[发明专利]一种复合细菌纤维素医用敷料的制备方法

摘要

本发明涉及一种复合细菌纤维素医用敷料的制备方法，属于生物材料制备技术领域。本发明首先将酿酒酵母菌、醋化醋杆菌和木葡糖酸醋杆菌接种到自制的活化培养基中进行活化培养后，再将活化后的菌种接种到种子培养基中进行培养，随后将种子液接种到发酵罐中与海藻酸钠、硫酸软骨素等一起进行厌氧发酵，再将得到的细菌纤维素膜取出并去除菌体和培养基，最后与地榆提取物进行冷冻干燥、缓冲溶液浸泡等操作得到一种复合细菌纤维素医用敷料。本发明解决了生物敷料需要不能用于干燥伤口的问题，并且本发明制备的医用敷料能够透过坚硬的坏死组织进入伤口内部，使伤口快速愈合，并且作用于软骨组织时，还能使促进软骨组织生长。

主权项

一种复合细菌纤维素医用敷料的制备方法，其特征在于具体制备步骤为：（1）量取300～400mL去离子水加入到烧杯中，加热至沸腾，然后停止加热，再加入15～20g绿茶，浸泡30～40min，过滤，收集滤液，再加入20～30g蔗糖、5～8g蛋白胨、8～10g酵母粉，搅拌5～10min，并移入灭菌罐，在120～130℃下高温灭菌10～20min，制得种子培养基，备用；（2）称取100～200g马铃薯泥、10～20g葡萄糖和10～15g琼脂加入到培养皿中，再加入800～1000mL去离子水，搅拌均匀后，再加入质量浓度为5%醋酸溶液调节pH至6.5～6.8，随后移入灭菌罐中，在110～120℃下高温灭菌20～30min，制得活化培养基；（3）将3～5g酿酒酵母菌、3～5g醋化醋杆菌和6～8g木葡糖酸醋杆菌分别接种到三个活化培养基中，然后置于恒温培养箱中，在20～30℃下培养2～3天，将活化后的菌种按3～5%的接种量分别接种至备用的种子培养基中，于25～35℃、160～180r/min下摇床振荡24～36h；（4）然后分别将培养后的种子液按8～10%的接种量接种至同一发酵罐中，再称取10～20g葡萄糖、20～30g甘露醇、5～8g蛋白胨和800～1000mL去离子水一起加入到发酵罐中，搅拌10～20min后，再依次加入10～20g海藻酸钙、5～8g透明质酸、8～12g硫酸软骨素，搅拌均匀后，在25～35℃下厌氧发酵4～5天；（5）发酵完成后将细菌纤维素膜取出，然后用去离子水洗涤3～5次，再置于水浴锅中，在120～130℃下水浴加热1～2h，去除残余菌体和培养基，再用去离子水洗涤至中性，得到复合细菌纤维素；（6）称取10～20g地榆，用粉碎机进行粉碎，将地榆粉末加入到烧杯中，并加入200～300mL质量浓度为75%乙醇溶液，再置于超声波振荡仪中，在1000～1200W、50～60℃下超声振荡30～40min，过滤，得到滤液，将细菌纤维素和滤液一起加入到已消毒的模具中冷冻干燥得到复合膜，然后再置于烘箱中，在60～70℃下干燥3～4h，再置于烧杯中，加入pH为5.5～5.8的醋酸‑醋酸钠缓冲溶液将复合膜浸没，常温下浸泡1～2天，然后将复合膜取出并自然晾干，于2～4℃下保存，即可得到一种复合细菌纤维素医用敷料。