[发明专利]一种具有生物活性的再生期器官去细胞生物支架的制备方法及其产品和应用

摘要

本发明公开了一种具有生物活性的再生期器官去细胞生物支架的制备方法及其产品和应用，该方法主要采用家用洗涤剂和微量消化液混合液以灌注的方式去除离体再生期器官供体的细胞成分，获取无细胞成分的器官生物支架。由于该无细胞成分的器官生物支架是基于离体再生期器官供体制得，与来源于健康正常个体的天然器官制备的去细胞生物支架相比，在细胞因子分布、体外3‑D培养诱导种子细胞功能性细胞定向诱导分化、成器官潜能和对衰竭器官修复再生等方面有着本质的不同，具有“生物活性”。本发明为进行器官工程与再生以及转化医学研究提出了新的思路和可行性模型，具有广阔的临床推广应用前景和较高的社会价值。

主权项

1.一种具有生物活性的再生期器官去细胞生物支架的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：（1）取离体再生期器官供体，采用生理盐水以灌注的方式洗出所述离体再生期器官中的红细胞；（2）采用无菌双蒸水以灌注的方式溶解并洗出经步骤（1）处理过的器官中的细胞成分；（3）采用十二烷基硫酸钠和微量消化液的混合液以灌注的方式洗出经步骤（2）处理过的器官中的细胞成分；所述微量消化液为胰蛋白酶和乙二胺四乙酸的混合液；（4）采用无菌双蒸水以灌注的方式洗出经步骤（3）处理过的器官中的十二烷基硫酸钠和微量消化液的混合液；（5）采用磷酸缓冲盐溶液以灌注的方式洗出经步骤（4）处理过的器官中无菌双蒸水，恢复生理状态，制得具有生物活性的再生期器官去细胞生物支架；所述离体再生期器官为离体再生期肝脏器官；所述再生期器官是指器官在被切除一部分或者受损伤后，由于细胞死亡而数量急剧减少，各种修复再生信号通路由正常非活跃状态转变为快速生长活跃状态，刺激器官中的细胞因子、修复细胞进行增殖，以补偿丢失、损伤的器官组织和恢复器官的生理功能，处在这个过程的器官称为再生期器官。