[发明专利]一种克伦特罗快速检测方法有效
申请号: | 201610577324.0 | 申请日: | 2016-07-21 |
公开(公告)号: | CN106124716B | 公开(公告)日: | 2018-09-07 |
发明(设计)人: | 王利华;曾令文;韩艳云;肖康飞 | 申请(专利权)人: | 武汉市农业科学技术研究院农业环境安全检测研究所 |
主分类号: | G01N33/15 | 分类号: | G01N33/15 |
代理公司: | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人: | 汤东凤 |
地址: | 430070 湖北*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明提供了一种克伦特罗快速检测方法,包括如下的步骤:在Fe3O4@Au表面修饰上三聚氰胺;在脂质体合成的过程中原位包裹葡萄糖,同时通过衍生化反应将三聚氰胺修饰到脂质体的表面;将第一步和第二步中制得的材料混合,加入克伦特罗样品,由于三聚氰胺与克伦特罗之间的作用,形成三明治的夹心结构;加入表面活性剂,使脂质体结构裂解,葡萄糖得以释放,借助血糖仪检测上清液完成定量检测。本方法中的传感器构建过程和检测过程不需要昂贵的仪器和试剂,操作简单,灵敏度很高。 | ||
搜索关键词: | 一种 克伦特罗 快速 检测 方法 | ||
【主权项】:
1.一种克伦特罗快速检测方法,其特征在于,包括如下的步骤:1)将200mL三聚氰胺溶液加入2mL Fe3O4@Au中,搅拌均匀后,室温孵育6h;2)15.9mmol/L氢化大豆磷脂,6.4mmol/L胆固醇,0.2mmol/L衍生化处理的三聚氰胺依次溶解到氯仿、异丙醇醚和甲醇的混合溶剂中;然后将0.5mL 5.0mg/mL葡萄糖溶液加入5mL上述合成脂质体的混合物中,超声5min后,在氮气气氛保护下,以45℃的温度蒸发溶剂,制得凝胶状的悬浮液;用200nm的聚碳酸酯过滤膜过滤,得到尺寸均一的脂质体;未包裹的葡萄糖用纯水透析1.5‑5h,制得包裹有葡萄糖的、同时表面修饰了三聚氰胺的功能化脂质体;3)将50mL步骤1) 中制得的Fe3O4@Au与pH 7.0的克伦特罗溶液在室温条件下,孵育30min,PBS溶液洗涤2次后,加入50mL步骤2) 中制得的功能化脂质体,继续孵育30min,PBS溶液洗涤2次;4)在步骤3)中制得的溶液中加入20mL表面活性剂,反应15min,葡萄糖从破裂的脂质体结构中释放;取3mL上清液用于血糖仪的检测。
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