[发明专利]一种米尔贝霉素正调控基因milR及其过表达基因工程菌、制备方法和应用有效
| 申请号： | 201610570976.1 | 申请日： | 2016-07-19 |
| 公开（公告）号： | CN106191077B | 公开（公告）日： | 2019-07-02 |
| 发明（设计）人： | 向文胜;张艳艳;张继;王相晶;何海荣 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院植物保护研究所 |
| 主分类号： | C12N15/31 | 分类号： | C12N15/31;C12N1/21;C12N15/03;C12P17/18;C12R1/465 |
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| 地址： | 100193 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种米尔贝霉素正调控基因milR及其过表达基因工程菌、制备方法和应用。米尔贝霉素正调控基因milR基因序列如SEQ ID NO.1所示，构建含有该基因和上有启动子序列的过表达质粒，过表达质粒转化大肠杆菌宿主细胞，得到的转化子与冰城链霉菌进行接合转移，挑取具有安普霉素抗性的接合子，即得到高产米尔贝霉素的基因工程菌，上述基因工程菌发酵可生产米尔贝霉素。本发明提高了米尔贝霉素A3/A4的产量，降低了生产成本，提高了经济效益。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 米尔 霉素 调控 基因 milr 及其 表达 基因工程 制备 方法 应用 | ||
【主权项】：
1.一种产米尔贝霉素基因工程菌的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：1)构建米尔贝霉素正调控基因milR过表达质粒，其含有完整的米尔贝霉素正调控基因milR编码序列和上游启动子序列；2)将1)所得的米尔贝霉素正调控基因milR过表达质粒转化大肠杆菌宿主细胞，得到含有米尔贝霉素正调控基因milR过表达质粒的转化子；3)以冰城链霉菌为受体，将步骤2)得到的转化子与冰城链霉菌进行接合转移，挑取具有安普霉素抗性的接合子，即得到目标菌株；所述米尔贝霉素正调控基因milR，其序列如SEQ ID NO.1所示，编码一个由964个氨基酸组成的蛋白质，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
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