[发明专利]双功能复合探针构建荧光/比色双模MiRNA传感器有效

专利信息
申请号: 201610566984.9 申请日: 2016-07-19
公开(公告)号: CN106018372B 公开(公告)日: 2018-06-05
发明(设计)人: 梁琳琳;葛慎光;于京华;兰飞飞;李丽;任娜 申请(专利权)人: 济南大学
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68
代理公司: 济南誉丰专利代理事务所(普通合伙企业) 37240 代理人: 李茜
地址: 250022 山东*** 国省代码: 山东;37
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摘要: 发明公开了一种基于双功能纳米材料的金属增强荧光/比色双模生物传感器灵敏、快速检测MiRNA的方法。通过双模生物传感器的使用提高了检测结果的准确度,而双功能纳米材料因具有优良的磁性和增强荧光的性能即解决了可重复利用的问题又大大提高了检测的灵敏度。最后通过MiRNA与模板DNA特异性结合及磁性分离,沉淀用于再循环,上清液用于比色检测,实现了可视化、高灵敏、简便快速、节能的MiRNA检测。
搜索关键词: 双功能 双模 生物传感器 纳米材料 荧光 比色 灵敏 金属增强荧光 特异性结合 准确度 比色检测 磁性分离 复合探针 检测结果 快速检测 模板DNA 可视化 可重复 灵敏度 上清液 再循环 传感器 构建 沉淀 节能 检测
【主权项】:
荧光/比色双模MiRNA传感器的构建方法,其特征是包括以下步骤:1.1 制备双功能复合纳米材料,双功能复合纳米材料是指既能利用其磁性进行磁性分离,使信号探针可重复利用,又可以利用立方形状的银纳米粒子来增强荧光信号;1.2 将氮硫掺杂碳点功能化的DNA链,定义为DNA1,与双功能复合纳米材料连接,形成信号探针,磁性洗涤;1.3 将二氧化铈功能化的DNA链,定义为DNA2,加入到步骤1.2的溶液中,产生信号完全猝灭,磁性洗涤;1.4将步骤1.3所得的溶液中加入不同浓度的MiRNA,所得的溶液放入荧光设备中,在激发波长360 nm和发射波长424 nm下进行荧光测定;1.5 将步骤1.4所得溶液磁性分离,在含有与MiRNA杂交的二氧化铈功能化的DNA2的上清液中加入过氧化氢,进行可视化的比色测定;1.6 将步骤1.5所得的沉淀中补充二氧化铈功能化的DNA2,磁性洗涤,重复步骤1.4‑1.6,使信号探针得以再循环。
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