[发明专利]一种O型口蹄疫病毒抗体化学发光检测试剂盒

摘要

本发明涉及一种O型口蹄疫病毒抗体化学发光检测试剂盒，包括包被抗原聚苯乙烯板、单克隆抗体、标准品、发光底物A液和发光底物B液；所述包被抗原聚苯乙烯板为包被O型口蹄疫病毒RE2重组蛋白的不透明聚苯乙烯板所述单克隆抗体为述辣根过氧化物酶标记的O型口蹄疫病毒单克隆抗体；所述发光底物A液由鲁米诺，羟基香豆素，没食子酸，Tris‑Hcl缓冲液和水组成；所述标准品为采用校准品稀释液分别进行稀释的口蹄疫O型病毒抗体，稀释度分别为0 NU/mL、2NU/mL、5 NU/mL、10 NU/mL、30 NU/mL和60NU/mL。本发明试剂盒可用于检测O型口蹄疫病毒抗体，具有灵敏度高、检测范围宽的优点，且实现了口蹄疫抗体的定量检测。

主权项

一种O型口蹄疫病毒抗体化学发光检测试剂盒，包括包被抗原聚苯乙烯板、单克隆抗体、标准品、发光底物A液和发光底物B液，其特征在于：所述包被抗原聚苯乙烯板为包被O型口蹄疫病毒RE2重组蛋白的不透明聚苯乙烯板，其制备方法为，将O型口蹄疫病毒RE2重组蛋白作为包被抗原，按照包被抗原和包被缓冲液的体积比为1∶5000的比例，对包被抗原进行稀释；以100µl/孔的加样量将稀释后的包被抗原加入48孔或96孔的不透明的白色微孔板中，4℃条件下包被20h，洗涤液洗涤2‑3次，再加入封闭液150µl/孔，4℃条件下封闭16h后甩液，于37℃干燥3h，装袋封口；所述单克隆抗体为述辣根过氧化物酶标记的O型口蹄疫病毒单克隆抗体，工作浓度为1:600；所述发光底物A液由以下成分组成：鲁米诺0.15mmol/L，羟基香豆素0.59mmol/L，没食子酸0.35mmol/L，Tris‑Hcl缓冲液0.2mol/L，余量为水；发光底物B液由下列成分组成：氨基酸氧化酶0.85mmol/L，吐温‑20体积浓度 0.8%，DTPA 0.5mmol/L，维生素C 0.12mmol/L和乙酸‑乙酸盐缓冲液0.2mol/L，余量为水；所述标准品为采用校准品稀释液分别进行稀释的口蹄疫O型病毒抗体，稀释度分别为0 NU/mL、2NU/mL、5 NU/mL、10 NU/mL、30 NU/mL和60NU/mL。