[发明专利]一种滇黄精的组培快繁方法

摘要

本发明公开了一种滇黄精的组培快繁方法，选择外植体、灭菌；接种到诱导分化培养基中，在光照强度为：1800‑2000Lx，光照周期为每天8‑10的条件下，培养温度为25‑27℃的条件下培养40‑50天；将诱导分化培养基中产生的带不定芽和突起的组织切割小块，接种到增殖培养基中进行增殖培养，实现不定芽的增殖；将增殖培养中获得的丛生芽直径≥0.5cm、高度≥3cm的芽，分切割为单体并切除叶片，接种到生根培养基中，在光照强度为1800‑2000Lx；光照周期为前20天10小时，以后每天12小时，培养温度为25‑27℃的条件下培养30‑35天，既可得到生根苗；最后驯化炼苗，成活率达95％以上。

主权项

1.一种滇黄精的组培快繁方法，其特征在于，按照以下步骤进行：步骤1、选择外植体；步骤2、外植体灭菌；步骤3、诱导分化培养：将灭菌外植体接种到诱导分化培养基中，在光照强度为：1800-2000Lx，光照周期为每天8-10小时，培养温度为25-27℃的条件下培养40-50天，芽基部膨大产生不定芽，芽基部形成突起和分化不定芽；步骤4、增殖继代培养：将诱导分化培养基中产生的带不定芽和突起的组织切割为0.5cm2的小块，接种到增殖培养基中进行增殖培养，实现不定芽的增殖；光照强度为1800-2000Lx，光照周期为每天10-12小时，培养温度为25-27℃的培养条件下，培养25-30天，形成高度达4-5cm的丛生芽；步骤5、生根壮苗培养：将增殖继代培养中获得的丛生芽直径≥0.5cm、高度≥3cm的芽，分切割为单体并切除叶片，接种到生根培养基中，在光照强度为1800-2000Lx；光照周期为前20天10小时，以后每天12小时，培养温度为25-27℃的条件下培养30-35天，即可得到生根苗；根茎芽直径＜0.5cm的小苗转接到步骤4的增殖培养基中再增殖；步骤6、驯化炼苗：生根培养30-35天，将生根苗从瓶内取出，用自来水冲洗干净培养茎，并用兑 水稀释2000倍多菌灵溶液浸泡3-5min，种植到基质中，遮光70％，保持65-70％的空气湿度，30d后成活率达95％以上；所述步骤1选择外植体的具体过程为：每年的3-4月份，选择生长健壮，产量高，性状稳定，无病虫害，带萌动芽的根茎；所述步骤2外植体灭菌的具体过程为：步骤a、将带萌动芽的根茎从土壤中挖出，洗去泥土，并用水冲洗干净，切取长度为4-5cm带顶芽的根状茎，放入浓度为200ppm的农用链霉素溶液中浸泡30min进行预处理灭菌，再用自来水冲洗干净；步骤b、在无菌工作台内将预处理的外植体放入浓度为0.1％的升汞溶液中，并加入吐温1-2滴，连续摇晃，浸泡18-20min后取出，用无菌水冲洗4-5次，再用无菌滤纸吸干外植体表面水分，切取长度为：2-3cm顶芽，接种到诱导分化培养基中；所述步骤3中，诱导分化培养基为：MS+6-BA4mg/L+2, 4-D0.3mg/L+IBA0.2mg/L+糖30g/L+琼脂4.5g/L，pH值5.8-6；所述步骤4中，增殖培养基为：MS+6-BA3.5mg/L+NAA0.2mg/L+糖30g/L+琼脂4.5g/L，pH值5.8-6；所述步骤5中，生根培养基为：MS+6-BA0.4mg/L+NAA0.8mg/L+糖30g/L+琼脂4.5g/L，pH值5.8-6；所述步骤6中，基质为按照质量份数比为草炭土：珍珠岩＝4:1的混合物。