[发明专利]利用毛细管电泳技术对连翘中8种木脂素类成分进行定量测定的方法

摘要

本发明公开了一种利用毛细管电泳技术对连翘中8种木脂素类成分进行定量测定的方法。该方法包括以下步骤：供试样品溶液的制备、对照品溶液的制备、HPCE色谱条件的优化、标准曲线的制定及含量测定。采用本发明的方法在18min内实现了连翘中8种木脂素类成分的完全基线分离，该方法简便、专属性强、重复性好、分离度好，快捷准确，且不使用有机溶剂，环保高效。本发明的提出为今后药材连翘的质量评价提供了一种经济、环保、高效的技术手段。

主权项

1.一种利用毛细管电泳技术对连翘中8种木脂素类成分进行定量测定的方法，其特征在于包括以下步骤:(1)供试样品溶液的制备精密称取连翘果的干燥粉末或连翘提取物的干燥粉末，每克干燥粉末加入20％(v/v)甲醇5ml，超声提取30min，共提取3次，放冷后，用20％(v/v)甲醇调整至15ml，混合物在4℃4000rpm，离心5分钟，上层清液经微孔滤膜过滤，即得供试样品溶液；(2)对照品溶液的制备精密称取连翘中8种木脂素类成分的对照品，分别用50％(v/v)甲醇配制成不同浓度的对照品溶液；(3)HPCE色谱条件色谱柱：石英毛细管柱；流动相：50mM四硼酸钠、2mMβ‑CD以及5％(v/v)甲醇混合得到的电解质缓冲液，采用阳极0.5psi压力进样，时间5s，检测波长234nm，分离电压为+20kV，柱温35℃，在选定实验条件下进行分离，分离进行3‑5次后，更换缓冲液；(4)标准曲线的制定及计算结果将不同浓度的8种对照品溶液在步骤(3)的色谱条件下分析，以分析物和内标物峰面积比值为纵坐标，分析物的浓度为横坐标，分别绘制8种木脂素类成分的标准曲线，将供试样品溶液在步骤(3)的色谱条件下分析，将8种分析物与内标物峰面积比值代入标准曲线，分别得到样品中8种木脂素类成分的含量；所述的8种木脂素类成分依次为连翘苷，连翘脂素，表松脂醇‑4‑O‑β‑D‑葡萄吡喃糖苷，(+)松脂素‑4‑O‑β‑D‑葡萄吡喃糖苷，(‑)‑落叶松树脂醇，(+)松脂素，异落叶松脂素以及vladinol D。