[发明专利]酶偶联核酸-银纳米探针有效
申请号: | 201610526250.8 | 申请日: | 2016-07-06 |
公开(公告)号: | CN106018371B | 公开(公告)日: | 2019-02-15 |
发明(设计)人: | 仰大勇;张志昆;刘阳;杨璐 | 申请(专利权)人: | 天津大学 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64 |
代理公司: | 天津市北洋有限责任专利代理事务所 12201 | 代理人: | 陆艺 |
地址: | 300072*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | 本发明公开了一种酶偶联核酸‑银纳米探针,用下述方法制成:(1)分别用磷酸盐缓冲溶液为溶剂配制寡聚核苷酸溶液,硝酸银溶液,和硼氢化钠溶液;(2)取寡聚核苷酸溶液和硝酸银溶液,混合均匀,加入磷酸盐缓冲溶液,搅拌,加入硼氢化钠溶液,搅拌,(3)向步骤(2)获得的液体中加入FeSO4水溶液,加入D‑氨基酸氧化酶水溶液,震荡混匀;所述寡聚核苷酸为5ˊ–CCCTTAATCCCC–3ˊ,本发明的探针用于荧光分析法,对食品中的D‑氨基酸进行检测,检测下线可达到10nM;具有分析灵敏度高、选择性强和使用简便等优点;与传统的检测方法相比,样品无需进行衍生化,操作简单、成本低,实现D‑氨基酸的快捷、方便的检测。 | ||
搜索关键词: | 酶偶联 核酸 纳米 探针 | ||
【主权项】:
1.一种酶偶联核酸‑银纳米探针,其特征是用下述方法制成:(1)分别用磷酸盐缓冲溶液为溶剂配制0.1‑0.5mM寡聚核苷酸溶液,配制0.7‑3.5mM的硝酸银溶液和配制0.7‑3.5mM硼氢化钠溶液;(2)取50μL所述寡聚核苷酸溶液和50μL硝酸银溶液,混合均匀,加入4.85mL的磷酸盐缓冲溶液,搅拌15‑25min,加入50μL硼氢化钠溶液,搅拌50‑90min;所述寡聚核苷酸、硝酸银和硼氢化钠的摩尔比为:1:7:7;(3)向步骤(2)获得的液体中加入0.56mL的0.5‑5.0mM的FeSO4水溶液,加入25‑40μL的100000U/L D‑氨基酸氧化酶水溶液,震荡混匀;所述磷酸盐缓冲溶液的浓度为20mM,pH为6.8;所述寡聚核苷酸的序列为5ˊ–CCCTTAATCCCC–3ˊ。
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