[发明专利]多重实时定量PCR检测染色体非整倍体的试剂盒及其应用

摘要

本发明公开了一种多重实时定量PCR检测染色体非整倍体的试剂盒及其应用。该试剂盒包括以下引物对和探针：用于扩增目标染色体的多个基因和非基因位点的n1对引物对和相关的探针；所述的目标染色体为可发生染色体数量变异疾病的染色体；以及用于扩增参照染色体的多个基因和非基因位点的n2对引物对和相关的探针；所述参照染色体为一个或多个常染色体；其中，n1、n2分别≥1。本发明可以对妊娠妇女进行包括唐氏综合症，爱德华氏综合症，帕陶氏综合症和其他染色体异常疾病无创产前筛查。该试剂盒具有早期、安全无创、准确、快速、适合大规模检测和临床应用等优点，能避免妇女妊娠中后期胎儿宫内感染、流产、死亡，达到优生优育目的。

主权项

1.一种引物和探针集合在制备多重实时定量PCR检测染色体非整倍体的试剂盒中的应用，其特征在于，所述引物和探针集合包括以下引物对和探针：/n(i)用于扩增目标染色体的多个基因和非基因位点的n1对引物对和相关的探针；所述的目标染色体为可发生染色体数量变异疾病的染色体；以及/n(ii)用于扩增参照染色体的多个基因和非基因位点的n2对引物对和相关的探针；所述参照染色体为一个或多个常染色体；/n其中，n1、n2分别≥1；/n所述引物和探针集合在制备多重实时定量PCR检测染色体非整倍体的试剂盒中的应用，具有以下步骤：/n(a)提供含有胎儿游离DNA的妊娠母体外周血样本；/n(b)从所述外周血样本分离去除细胞，并从去除细胞的样本中通过过滤离心、甲基化分离等方法富集胎儿小于500bp的游离DNA片段达50-100％，得到DNA样本；/n(c)将所述富集后的DNA样本分为实验组和对照组，其中，/n在实验组中，以所述富集后的DNA样本为模板，用所述n1对引物对进行qPCR，并记录C