[发明专利]专一性产γ-环糊精的γ-环糊精葡萄糖基转移酶的突变体及其制备方法在审
申请号: | 201610511819.3 | 申请日: | 2016-06-30 |
公开(公告)号: | CN105925547A | 公开(公告)日: | 2016-09-07 |
发明(设计)人: | 王金鹏;范浩然;张梦柯;李林林;金征宇;谢正军;赵建伟;周星;柏玉香;田耀旗;焦爱权;孟令儒 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12N9/10 | 分类号: | C12N9/10;C12N15/54;C12N15/70;C12P19/18;C12P19/04 |
代理公司: | 无锡华源专利商标事务所(普通合伙) 32228 | 代理人: | 冯智文;聂启新 |
地址: | 214122 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种专一性产γ‑环糊精的γ‑环糊精葡萄糖基转移酶的突变体,将菌株Alkalophilic Bacillus sp.G‑825‑6的γ‑环糊精葡萄糖基转移酶第211位的酪氨酸突变为亮氨酸,得到突变体Y211L;其制备方法为:(1)设计突变引物,进行突变PCR;(2)将PCR后的质粒进行DpnI酶切后转化至超级感受态细胞XL‑10‑Gold中;(3)挑取阳性克隆进行培养提取质粒DNA;(4)测序确定突变完成。本发明所构建的突变体Y211L,催化淀粉不产生α‑环糊精,产生β‑环糊精的相对含量为3%,产生γ‑环糊精的相对含量为97%,具有较强的γ‑环糊精制备专一性,为γ‑环糊精的规模化生产提供有效保障。 | ||
搜索关键词: | 专一性 环糊精 葡萄 糖基转移酶 突变体 及其 制备 方法 | ||
【主权项】:
一种专一性产γ‑环糊精的γ‑环糊精葡萄糖基转移酶的突变体,其特征在于,将来自于Alkalophilic Bacillus sp.G‑825‑6菌株的γ‑环糊精葡萄糖基转移酶(γ‑CGTase)第211位的酪氨酸突变为亮氨酸,得到突变体Y211L。
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