[发明专利]基于"石英杯中激发型"流式细胞分选仪的染色体分选方法有效
申请号: | 201610472006.8 | 申请日: | 2016-06-24 |
公开(公告)号: | CN106198358B | 公开(公告)日: | 2019-02-15 |
发明(设计)人: | 吴后男;黄粤;贾玉艳;刘云 | 申请(专利权)人: | 北京大学;中国医学科学院基础医学研究所 |
主分类号: | G01N15/14 | 分类号: | G01N15/14 |
代理公司: | 北京戈程知识产权代理有限公司 11314 | 代理人: | 程伟;韩文华 |
地址: | 100191*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明提供了一种基于“石英杯中激发型”流式细胞分选仪的染色体分选方法。进一步地,本发明提供了用于分选的染色体样品的制备方法。所述方法包括将制备的Hoechst 33258和色霉素A3染色后的染色体悬液在基于“石英杯中激发型”流式细胞分选仪上分选,其中使用的UV和444nm激光器功率分别为50mW和20mW,获得了高分辨率的二变量流式核型图,并分选得到了高纯度的染色体。 | ||
搜索关键词: | 基于 石英 激发 细胞 分选 染色体 方法 | ||
【主权项】:
1.一种基于“石英杯中激发型”流式细胞分选仪的染色体分选方法,所述方法包括以下步骤:i)离心收获的细胞,悬浮培养于低渗液中;ii)离心i)获得的悬浮液,将细胞重悬于冰冻的多胺分离液中;iii)剧烈涡旋震荡ii)获得的细胞悬浮液,离心,过滤筛选;iv)步骤iii)获得的染色体悬液与Hoechst 33258和色霉素A3过夜孵育染色;v)染色后的染色体悬液与柠檬酸钠和亚硫酸钠冰上孵育;vi)将步骤v)获得的染色后的染色体悬液在基于“石英杯中激发型”流式细胞分选仪上分选,其中“石英杯中激发型”流式细胞分选仪使用的UV和444nm激光器功率分别为50mW和20mW。
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