[发明专利]一种亚氨基二乙酸的制备方法

摘要

本发明公开了一种亚氨基二乙酸的制备方法，属于亚氨基二乙酸制备技术领域。本发明取明胶胨、硫酸钾等制得培养基，分为两份后，将一份培养基与甘氨酸胺混合得培养基A，另一份为培养基B，将假单胞菌接种至培养基A上培养，离心后得到变异假单胞菌，再接种至培养基B培养，离心加入制得发酵液中发酵、减压蒸馏制得甘氨酸，与乙醇溶液、浓硫酸反应得甘氨酸乙酯，加入所得氯乙酸乙酯和四氢呋喃水浴搅拌反应，减压蒸馏得固体物，与去离子水、酯酶混合，经过滤、减压蒸馏、干燥制得亚氨基二乙酸。本发明的有益效果是：本发明所得产品质量好，钠盐含量降低了25.4～26.8%；制备过程消耗低，收率提高了28.6～29.8%，纯度提高了26.3～27.9%。

主权项

一种亚氨基二乙酸的制备方法，其特征在于具体制备特征在于：（1）分别称取15～17g明胶胨、10～12g胰蛋白胨、10～12g硫酸钾、1～3g氯化镁、15～17g琼脂加入到盛有1～2L去离子水的烧杯中，搅拌10～20min，制成培养基，将培养基分成两份，向其中一份培养基中加入18～20g甘氨酸胺，搅拌5～10min，得培养基A，另一份为培养基B，备用；（2）接种4～6株假单胞菌到上述培养基A上，在36～38℃下，用摇床振荡培养16～18h后，将培养液在5000～8000r/min下离心20～30min，弃去上清液，得变异假单胞菌；（3）接种上述2～3株变异假单胞菌到培养基B上，在36～38℃下，用摇床振荡培养16～18h后，将培养液在5000～8000r/min下离心20～30min，弃去上清液，得培养后变异假单胞菌，备用；（4）向发酵罐中依次加入200～300mL质量分数为12～14%葡萄糖溶液、2.0～4.0g尿素、0.4～0.6g磷酸二氢钾、0.1～0.3g磷酸氢二钠、0.1～0.3g硫酸镁、0.1～0.3g硫酸锌、10～20g碳酸钙，搅拌制成发酵液；（5）向上述发酵液中加入步骤（3）中备用的培养后变异假单胞菌，搅拌均匀后，在30～40℃下，发酵24～26h，待发酵结束，将温度升至100～120℃，搅拌20～30min，过滤，将滤液进行减压蒸馏，得到甘氨酸；（6）称取10～20g上述的甘氨酸加入到烧瓶中，将烧瓶置于水浴锅中，向烧瓶中分别加入100～200mL质量分数为95%乙醇溶液和1～2mL质量浓度为98%浓硫酸，控制温度在65～75℃，搅拌反应2～3h，将反应液减压蒸馏，得到甘氨酸乙酯，备用；（7）称取10～20g氯乙酸加入到烧瓶中，将烧瓶置于水浴锅中，再分别向烧瓶中加入100～200mL质量浓度为95%乙醇溶液和1～2mL质量浓度为98%浓硫酸，控制温度在65～75℃，搅拌反应2～3h，将反应液减压蒸馏，得到氯乙酸乙酯；（8）将上述氯乙酸乙酯加入到盛有100～200mL四氢呋喃的烧瓶中，再将烧瓶置于水浴锅中，控制温度在60～70℃，将步骤（6）备用的甘氨酸乙酯加入到烧瓶中搅拌反应2～3h，将反应液进行减压蒸馏，得固体物；（9）将上述固体物加入到盛有200～300mL去离子水的烧瓶中，向烧瓶中加入2～3g酯酶，搅拌20～30min，将烧瓶置于水浴锅中，控制温度在80～90℃，搅拌20～30min，过滤，得滤液，将滤液进行减压蒸馏，得到固体，将固体置于95～105℃烘箱内干燥2～3h，得到亚氨基二乙酸。