[发明专利]制备人造微环境的方法及其应用有效
| 申请号： | 201610443519.6 | 申请日： | 2016-06-20 |
| 公开（公告）号： | CN105999414B | 公开（公告）日： | 2019-12-17 |
| 发明（设计）人： | 杜亚楠;李雅倩;蒋书萌 | 申请（专利权）人： | 清华大学 |
| 主分类号： | A61L27/36 | 分类号： | A61L27/36;A61L27/22;A61L27/50;A61L27/60 |
| 代理公司： | 11201 北京清亦华知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人： | 李志东 |
| 地址： | 100084 北京*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明涉及制备人造微环境的方法及其应用，具体地，所述方法包括：(1)将功能细胞接种在固相载体上；(2)将步骤(1)所获得的固相载体在适于所述功能细胞生长的条件下保持预定时间；以及(3)将步骤(2)所获得的固相载体进行脱细胞化处理，以便获得所述人造微环境。利用本发明所提供的方法，可以制备获得具备低免疫原性，良好的可控性，质量稳定，生产周期短和成分可调控特点并可实现定制化的人造微环境。 | ||
| 搜索关键词： | 制备 人造 环境 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
1.一种制备人造微环境的方法，其特征在于，包括：/n(1)将功能细胞接种在固相载体上，所述功能细胞为动物干细胞；/n(2)将步骤(1)所获得的固相载体在适于所述功能细胞生长的条件下保持预定时间，以便形成仿生人造组织；以及/n(3)将形成有仿生人造组织的所述固相载体进行脱细胞化处理，以便获得所述人造微环境；/n其中：/n所述接种是将单细胞悬浮液滴加至所述固相载体上进行的，其中，所述单细胞悬浮液含有所述功能细胞；/n所述脱细胞化处理是通过如下方式进行的：/n1)将形成有仿生人造组织的所述固相载体进行第一清洗处理，所述第一清洗处理是利用PBS进行的，/n2)将第一清洗处理后的固相载体进行第二清洗处理，所述第二清洗处理是利用离子洗涤剂SDC进行2小时，以完全去除细胞，/n3)将第二清洗处理后的固相载体进行第三清洗处理，所述第三清洗处理是利用DNA酶和RNA酶进行2小时，以完全清洗DNA及RNA，/n4)将第三清洗处理后的固相载体进行第四清洗处理，所述第四清洗处理是利用PBS进行2小时，/n5)将第四清洗处理后的固相载体进行冷冻干燥，以便获得所述人造微环境；/n所述固相载体为三维多孔支架，所述三维多孔支架的孔径为1-999μm，孔间距为1-999μm，孔隙率参数为50％-99.9％，所述三维多孔支架的体积为1μm
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