[发明专利]一种双功能酸性脲酶基因及其表达与应用有效
| 申请号： | 201610439700.X | 申请日： | 2016-06-20 |
| 公开（公告）号： | CN105950596B | 公开（公告）日： | 2019-06-21 |
| 发明（设计）人： | 康振;陈坚;堵国成;刘庆涛 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N9/80 | 分类号： | C12N9/80;C12N15/55;C12G3/02;C12G1/022 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 耿晓岳 |
| 地址： | 214122 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种双功能酸性脲酶基因及其表达与应用，属于生物工程技术领域。本发明的双功能酸性脲酶是来自于普罗威登斯菌(Providencia sp.LBBE)，基因排列顺序为D、A、B、C、E、F、G，能够耐受高浓度乙醇的同时高效降解氨基甲酸乙酯和尿素。本发明利用大肠杆菌表达系统BL21(DE3)/pRSFDuet‑1，成功实现了具有双功能酸性脲酶基因的高效表达，以EC为底物时酶活达到0.39U/ml，以尿素为底物时酶活达到4.82U/ml。重组酶在20％的乙醇中37℃保留4h，以EC为底物时仍可保留其93％以上的活性。本发明所发现的双功能酸性脲酶是一种新的脲酶，所制备的重组酶为实现黄酒中EC及尿素的消除，实现EC水解酶工业化生产奠定了基础，具有巨大的经济及社会效益。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 功能 酸性 脲酶 基因 及其 表达 应用 | ||
【主权项】：
1.一种双功能酸性脲酶，其特征在于，所述双功能酸性脲酶为：(1)由氨基酸序列分别如SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4所示的结构亚基UreA、UreB、UreC组成或(2)核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
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