[发明专利]一种黄缘盒龟粪便提取DNA的方法有效
| 申请号： | 201610439317.4 | 申请日： | 2016-06-17 |
| 公开（公告）号： | CN105886495B | 公开（公告）日： | 2020-04-21 |
| 发明（设计）人： | 寿建昕 | 申请（专利权）人： | 绍兴文理学院元培学院 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 杭州君度专利代理事务所(特殊普通合伙) 33240 | 代理人： | 杨天娇 |
| 地址： | 312000 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种黄缘盒龟粪便提取DNA的方法，属于DNA分离纯化技术领域。将黄缘盒龟粪便作为样品采集后，立即装入灭过菌的离心管中，用DETs浸泡；离心管中，加入二硫苏糖醇裂解液，裂解液与粪便混匀后水浴处理；加入蛋白酶K（PK）定量后，冰上静置；离心，取上清至另一无菌离心管中，弃沉淀；向上清中加入等体积的酚/氯仿/异戊醇混合液抽提；加入NaAc在旋涡混合器上混匀后，再加入预冷的无水乙醇，充分混匀后静置；再次离心，吸弃上清，沉淀在室温中凉干；加入乙醇，重新洗涤沉淀；室温晾干，当沉淀趋于透明时加入TE溶解。将发明应用于黄缘盒龟DNA提取，具有操作便捷、黄缘盒龟损伤小等优点。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 黄缘盒龟 粪便 提取 dna 方法 | ||
【主权项】：
一种黄缘盒龟粪便提取DNA的方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）将黄缘盒龟粪便作为样品采集后，立即装入灭过菌的离心管中，用DETs浸泡；（2）取上述浸泡中的粪便于离心管中，加入裂解液，裂解液与粪便混匀后水浴处理；（3）加入蛋白酶K定量后，立即放入冰上静置；（4）离心，取上清至另一无菌离心管中，弃沉淀；向上清中加入等体积的酚/氯仿/异戊醇混合液抽提；（5）加入NaAc在旋涡混合器上混匀后，再加入预冷的无水乙醇，充分混匀后静置；（6）再次离心，吸弃上清，沉淀在室温中凉干；（7）加入体积浓度70%乙醇，重新洗涤沉淀；（8）室温晾干，当沉淀趋于透明时加入TE溶解。
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