[发明专利]一种测定生物样品中糖复合物含量的新方法

摘要

由于缺少灵敏适用范围广的检测方法,糖复合在生物样品中的检测和示踪方法,已成为其药代动力学研究中的瓶颈问题。本发明是关于,包括糖蛋白、多糖、糖脂的含量测定方法。通过制备糖复合物的碘代衍生物后，以ICP‑MS测定其在生物样品中碘的含量，再根据糖复合物中的碘含量，计算出测定样品种糖复合物的含量，为集成创新方法。该方法灵敏度高、结果准确、操作简单、无放射性污染、适用范围广。

主权项

1.一种测定生物样品中多糖含量的新方法,所述的新方法为：(1)对于不含有游离氨基的多糖、糖脂，可首先制备它们与荧光素的衍生物，再与碘进行取代反应，具体操作方法为：取样品1g，溶解二甲基亚砜在10ml中，加吡啶10滴，加入荧光素0.1g，再加入二月桂酸二丁基锡20mg，95℃混合加热2小时，加入无水乙醇50mL，放置,倾去上清,以乙醇反复清洗,洗去多余的染料，离心，得荧光素‑多糖复合物；(2)取步骤(1)所制备的荧光素‑多糖复合物样品0.2g，以水5ml溶解，以氯胺T为催化剂，加入浓度为0.5mol/L的碘化钾碘1ml，进行碘代反应，反应产物经凝胶柱层析纯化，收集糖蛋白类化合物部分，冷冻干燥得到碘代糖蛋白；(3)由步骤(2)所制备的碘代糖蛋白，进行动物或细胞实验，收集需测定的样品，经消化后，以ICP‑MS测定样品中碘的含量，根据样品中碘的标记量，换算成各样品中糖复合物的含量。