[发明专利]富硒高虫草素含量的虫草子实体的培养方法

摘要

本发明公开了一种富硒高虫草素含量的虫草子实体的培养方法，依次包括菌种的活化、液体菌种的制备、制备大米培养基、灭菌、接种、菌丝体的培养、转色、子实体的培养、采收等步骤。本发明培养出的虫草子实体不仅硒元素的含量高，还能使培养出的虫草药用价值更高且安全性好。

主权项

一种富硒高虫草素含量的虫草子实体的培养方法，其特征是：依次包括下列步骤：（1）菌种的活化：将蛹虫草菌种接在以下组分的液体培养基中进行活化和优化：葡萄糖15‑20克，硫酸镁1‑2克，磷酸二氢钾1‑2克，维生素B1 0.1‑0.5毫克，白海参研磨液45‑55克，酵母浸粉3‑5克，琼脂粉15‑20克，加水至1000毫升；将上述液体培养基在121℃，0.1MPa条件下灭菌30分钟，待冷却后倒入培养皿中；将蛹虫草菌种接入培养皿中，22℃黑暗条件下培养5‑10天，菌落再转接到斜面培养基上，22℃黑暗条件下培养5‑10天，所得菌种即所需虫草菌种；（2）液体菌种的制备：首先按下列配方配制营养液A：葡萄糖15‑20克，硫酸镁1‑2克，磷酸二氢钾1‑2克，维生素B1 0.1‑0.5毫克，白海参研磨液45‑55克，酵母浸粉3‑5克，加水至1000毫升；将营养液A分装在500毫升的锥形瓶中，每瓶250毫升，封口膜封口，在121℃，0.1MPa条件下，灭菌30分钟，待冷却后在超净台上接入经步骤（1）活化的虫草菌种，再在130转/分钟，22℃的摇床中震荡培养5‑9天；（3）制备大米培养基：先按以下配方配置营养液B：葡萄糖15‑20克，硫酸镁1‑2克，磷酸二氢钾1‑2克，维生素B1 0.1‑0.5毫克，白海参研磨液45‑55克，酵母浸粉3‑5克，加水至1000毫升；大米培养基的制备：用350毫升的广口培养瓶，每瓶按下列比例装入培养料：大米35‑40克，营养液B 40~50毫升，用带通气孔的盖子盖紧或用聚乙烯塑料膜扎紧培养瓶瓶口；（4）灭菌：将培养瓶放在121℃，0.1MPa条件下，灭菌30分钟；（5）接种：在无菌条件下，每个培养瓶接入5毫升液体菌种，封口；（6）菌丝体的培养：将接种后的培养瓶移入黑暗条件下培养；开始温度保持16℃~18℃ 4~6天；待培养瓶表面长满白色菌丝后将温度升至20℃~24℃条件下再培养4~6天，待菌丝吃透培养基后，将培养瓶移到光下培养；（7）转色：保持室内温度20℃~22℃，湿度60%~70%，光照强度800勒克斯，光照时间每天12~14小时；将培养瓶培养3~5天后可见菌丝由白色逐渐转为橘黄色，之后将夜间温度降至10℃~15℃保持昼夜有5~10℃的温差，待菌丝表面布满米粒大小的突起时，停止昼夜温差转为恒温培养；（8）子实体的培养：保持室内温度20℃~22℃，湿度60%~70%，光照强度600~800 勒克斯，光照时间每天12~14小时，待子实体长到3~4厘米后将室内湿度提高到75%~85%，温度和光照时间不变；（9）采收：待子实体长到6~8厘米时，用镊子将子实体从培养瓶中夹出，放在通风干燥处自然风干或65℃烘箱中烘干，将干的子实体装在密闭的塑料袋中避光保存。