[发明专利]一种NovQ芳香族异戊烯基转移酶催化合成维生素K2的方法有效
申请号: | 201610392463.6 | 申请日: | 2016-05-31 |
公开(公告)号: | CN105861582B | 公开(公告)日: | 2019-04-16 |
发明(设计)人: | 郑之明;李哲敏;赵根海;刘会;王鹏;王丽;吴荷芳;尉鸿飞;孙孝娟;王晗;孙小雯 | 申请(专利权)人: | 中国科学院合肥物质科学研究院 |
主分类号: | C12P7/66 | 分类号: | C12P7/66 |
代理公司: | 合肥市浩智运专利代理事务所(普通合伙) 34124 | 代理人: | 丁瑞瑞 |
地址: | 230088 安徽*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | 本发明公开一种NovQ芳香族异戊烯基转移酶催化合成维生素K2的方法,(1)维生素K3溶解于乙醇水溶液中,加入NaBH4,在N2保护下,控制温度不超过50℃,搅拌反应至体系呈淡绿色透明液体,中和至pH4.0后,用乙酸乙酯萃取产物,浓缩后冷冻结晶,过滤除清液得到维生素K3氢醌;(2)将维生素K3氢醌和DMAPP加入酶促反应体系中,反应在密闭和N2保护条件下进行,反应完成后,加入Fe3+,去除N2保护,充分氧化后,使用乙酸乙酯萃取得到产物。本发明核心环节为生物酶催化工程技术,利用廉价的维生素K3催化合成高值的维生素K2。本发明生产工艺简单,生产成本低廉,生产过程绿色环保。 | ||
搜索关键词: | 一种 novq 芳香族 戊烯 转移酶 催化 合成 维生素 sub 方法 | ||
【主权项】:
1.一种NovQ芳香族异戊烯基转移酶催化合成维生素K2的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)维生素K3溶解于乙醇水溶液中,加入NaBH4,在N2保护下,控制温度不超过50℃,搅拌反应至体系呈淡绿色透明液体,中和至pH4.0后,用乙酸乙酯萃取产物,浓缩后冷冻结晶,过滤除清液得到维生素K3氢醌;(2)将维生素K3氢醌和DMAPP加入酶促反应体系中,反应体系包含NovQ芳香族异戊烯基转移酶,pH缓冲液,Mg2+,抗氧化剂;反应在密闭和N2保护条件下进行,反应完成后,加入Fe3+,去除N2保护,充分氧化后,使用乙酸乙酯萃取得到产物;所述的NovQ芳香族异戊烯基转移酶为重组NovQ芳香族异戊烯基转移酶或天然NovQ芳香族异戊烯基转移酶,浓度为0.1~4g/L;NovQ芳香族异戊烯基转移酶其氨基酸序列如序列表SEQ ID NO:6或SEQ ID NO:7所示。
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