[发明专利]一种植物组织快速石蜡制片的方法

摘要

本发明公开了一种植物组织快速石蜡制片的方法，该方法包括如下步骤：组装反应装置：反应装置由数控恒温加热套和圆底烧瓶组装而成，加入固定液；将小片段植物放入装置中，在60‑65℃固定处理5‑10min；在100‑110℃进行酒精梯度脱水各1‑2min；进行二甲苯透明处理1‑2min；加入熔化的石蜡，数控恒温加热，温度为65‑75℃，处理时间10‑15min，得到浸蜡植物片段；进行包埋处理；再进行切片，烘烤，最后进行染色处理，得到植物组织石蜡制片。本发明植物组织快速石蜡制片的方法与传统石蜡制片方法相比，制作周期大幅度缩短，由9天缩短到7小时。

主权项

一种植物组织快速石蜡制片的方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：步骤一：准备工作：组装反应装置，加入固定液，所述固定液配置重量比为甲醛∶冰乙酸∶酒精＝3‑5∶5‑8∶80‑95；步骤二：固定处理：将新鲜的植物组织切成小片段，片段尺寸为0.5‑1.5cm，然后放入反应装置中，数控恒温加热，温度范围为60‑65℃，处理时间为5‑10min，更换固定液，再重复处理2次；步骤三：脱水处理：倒掉步骤二中使用的固定液，依次更换重量百分比浓度分别为70％，85％，95％，100％，100％Ⅱ的酒精水溶液，将温度调到100‑110℃，在每种浓度酒精水溶液下各处理1‑2min，给植物片段进行酒精梯度脱水；步骤四：透明处理：倒掉步骤三脱水处理的酒精，按1:1体积比加入酒精和二甲苯，处理1‑2min；倒出酒精和二甲苯，换成纯二甲苯，再处理1‑2min，得到透明植物片段；步骤五：浸蜡处理：倒掉步骤四透明处理的纯二甲苯，加入熔化的石蜡，温度为65‑75℃，处理时间10‑15min，更换熔化的石蜡，再处理10‑15min，得到浸蜡植物片段；步骤六：包埋处理：将熔化的石蜡连同浸蜡植物片段一并倾于包埋盒内，迅速把植物片段树立起来并排列整齐，然后将其平平的放入冷水中，使其快速凝固，得到包埋好的植物片段；步骤七：切片处理：将步骤六得到的包埋好的植物片段修整成正方形蜡块，将其粘于小木块上，然后切片，将得到的切片粘在载玻片上，在30‑40℃温度下烘烤0.5‑1.5小时；步骤八：染色处理：采用番红‑固绿染色方法进行染色，然后封片。