[发明专利]一种髓核细胞分离纯化方法在审
申请号: | 201610371318.X | 申请日: | 2016-05-30 |
公开(公告)号: | CN106047801A | 公开(公告)日: | 2016-10-26 |
发明(设计)人: | 朱艳霞;周光前 | 申请(专利权)人: | 深圳大学 |
主分类号: | C12N5/077 | 分类号: | C12N5/077 |
代理公司: | 深圳鼎合诚知识产权代理有限公司 44281 | 代理人: | 向武桥;彭家恩 |
地址: | 518060 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种髓核细胞分离纯化方法,包括:冲洗步骤,将获取的椎间盘髓核组织用PBS冲洗干净;剪碎步骤,将所述组织剪碎;消化步骤,加入2倍体积的消化液,消化液是体积比为1:1的0.5%II型胶原酶和0.25%胰蛋白酶混合液,在恒温水浴箱震荡消化设定时长,静置后吸取上清液,加入含体积分数10%FBS的DMEM培养基终止消化,剩余组织加所述消化液继续消化,如此重复多次;收集步骤,将终止消化后的液体离心,离心转速为1000~1500rpm,离心时间为5~10min,去上清,用含体积分数10%FBS的DMEM培养基重悬髓核细胞沉淀。本方法分离纯化过程简单快捷,消化过程温和,消化时间短,所需仪器设备简单;所获得的髓核细胞量大,存活率高,更易于在培养瓶内贴壁、附着、延伸,细胞活性比较强。 | ||
搜索关键词: | 一种 细胞 分离 纯化 方法 | ||
【主权项】:
一种髓核细胞分离纯化方法,其特征在于,包括如下步骤:冲洗步骤,将椎间盘髓核组织冲洗干净;剪碎步骤,将所述组织剪碎;消化步骤,利用消化液消化所述组织;收集步骤,收集消化下来的髓核细胞。
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