[发明专利]一种两步法保育黄龙病染病柑橘种质的方法

摘要

本发明提供了一种两步法保育黄龙病染病柑橘种质的方法，取种子浸入70%酒精1分钟，用5%NaOH浸泡5分钟除去果胶，然后浸入3%次氯酸钠溶液20分钟，无菌水清洗2‑3次，接着在常温水中浸泡5‑10小时，随后用50‑55度的湿热空气进行热处理40‑60分钟，然后除去种皮，播种于加入恩诺沙星钠与磺胺间二甲氧嘧啶钠抗生素的MS培养基中，种苗长至5cm高后移载至灭菌营养土中培育，采取苗木生发的新稍作为接穗，嫁接在经过同样处理的砧木种子所生发的砧木实生苗上。本发明首次筛选了恩诺沙星钠与磺胺间二甲氧嘧啶钠的杀菌剂组合物进行合理混配；首次采用了热处理‑加杀菌剂两步法对黄龙病染病柑橘种质进行脱毒，脱毒效果更好。

主权项

一种两步法保育黄龙病染病柑橘种质的方法，其特征在于：所述方法包括如下：（1）预处理：在黄龙病染病柑橘母树上采集柑橘的种子，浸入70%酒精1分钟，再用5wt.%NaOH浸泡5分钟除去果胶，然后浸入3wt.%的次氯酸钠溶液20分钟，无菌水清洗2‑3次；（2）接着在无菌常温水中浸泡5‑10小时，随后用湿度>95%、温度为50‑55度的湿热空气进行热处理40‑60分钟，然后除去种皮；（3）将种子播种于加入含有恩诺沙星钠与磺胺间二甲氧嘧啶钠抗生素的MS培养基中，种苗长至5cm高后移载至灭菌营养土中培育，采取苗木生发的新稍作为接穗；（4）为防止砧木中潜伏有黄龙病，因此在外观健壮的砧木母树上采集种子后，仍然按照上述步骤（1）‑（3）同样的处理方法，获得砧木实生苗；（5）待砧木实生苗长高至30‑40cm后，即把步骤（3）中获得的新梢接穗嫁接在砧木实生苗上，分别在嫁接苗成活后12个月、24个月和36个月采集样品，进行检测黄龙病菌含量。