[发明专利]mRNA甲基化高通量检测方法在审
申请号: | 201610362981.3 | 申请日: | 2016-05-27 |
公开(公告)号: | CN106047997A | 公开(公告)日: | 2016-10-26 |
发明(设计)人: | 王新霞;汪以真;江芹 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C40B50/06 |
代理公司: | 杭州中成专利事务所有限公司 33212 | 代理人: | 金祺 |
地址: | 310058 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了一种mRNA甲基化高通量检测方法,包括以下步骤:mRNA样品提取;将提取的RNA样品进行片段化;将得到的RNA片段利用特异性识别mRNA上m6A甲基化(m6A)的抗体进行免疫富集;将步富集后含有m6A的mRNA片段洗脱后进行沉淀纯化;将所得纯化后的RNA反转录成cDNA,并进行DNA末端修复、接头连接和PCR扩增,完成mRNA甲基化文库的构建;将完成的文库利用分析测序文库的高通量测序平台进行测序。 | ||
搜索关键词: | mrna 甲基化 通量 检测 方法 | ||
【主权项】:
mRNA甲基化高通量检测方法,其特征在于包括以下步骤:1)、mRNA样品提取;2)、将步骤1)提取的RNA样品进行片段化;3)、将2)得到的RNA片段利用特异性识别mRNA上m6A甲基化(m6A)的抗体进行免疫富集;4)、将步骤3)富集后含有m6A的mRNA片段洗脱后进行沉淀纯化;5)、将步骤4)所得纯化后的RNA反转录成cDNA,并进行DNA末端修复、接头连接和PCR扩增,完成mRNA甲基化文库的构建;6)、将步骤5)完成的文库利用分析测序文库的高通量测序平台进行测序。
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