[发明专利]一种复合菌固态发酵玉米蛋白粉的制作方法

摘要

一种复合菌固态发酵玉米蛋白粉的制作方法属生物饲料技术领域，本发明包括下列步骤：1.选过40目筛的玉米蛋白粉作为发酵原料；2.制备活菌数为1.0×10⁸～1.0×10⁹cfu/ml的复合菌发酵种子液；3.将复合菌发酵种子液按6％接入玉米蛋白粉中，含水量为50％，自然pH值，混匀后得发酵基础料；4.将发酵基础料按40‑50cm厚度摊铺在发酵池底，发酵池温度保持在30～35℃，厌氧发酵72‑96h，得到发酵玉米蛋白粉；5.将发酵玉米蛋白粉在温度为50～55℃下烘干，降至室温，即得复合菌固态发酵玉米蛋白粉成品；本发明能将玉米蛋白大分子降解为小肽和游离氨基酸等，并有效去除苦味，提高适口性，可作为一种优质的蛋白质饲料资源，在饲料中添加能显著提高动物的免疫机能。

主权项

一种复合菌固态发酵玉米蛋白粉的制作方法，其特征在于包括下列步骤：1.1选取过40目筛的玉米蛋白粉作为发酵原料；1.2制备活菌数为1.0×10⁸～1.0×10⁹cfu/ml的复合菌发酵种子液，包括下列步骤：1.2.1将番茄汁20mL、酵母提取物5g、牛肉膏10g、乳糖20g、葡萄糖2g、K₂HPO₄2g、吐温801g、乙酸钠5g、水1000ml，pH值7.0，作为乳酸菌液体培养基；1.2.2用无菌吸管吸取步骤1.2.1所得的乳酸菌液体培养基，滴入装有乳酸菌冻干粉的瓶中，乳酸菌液体培养基和乳酸菌冻干粉的比例为1：10，按100次/min振荡，得到呈悬浮状的乳酸菌液；1.2.3用无菌吸管吸取步骤1.2.2所得的全部乳酸菌悬浮液，移植到MRS固体培养基中，37℃培养36～48h，然后接种到MRS斜面培养基上，斜面培养36～48h，再接种到步骤1.2.1的液体培养基中，进行振荡频率为160次/min的摇瓶培养12～24h，得到活菌数为1.0×10⁸～1.0×10⁹cfu/ml的乳酸菌发酵种子液；1.2.4将马铃薯200g/l、葡萄糖20g/l、水1000ml，作为黑曲霉液体培养基；1.2.5用无菌吸管吸取步骤1.2.4所得的黑曲霉液体培养基，滴入装有黑曲霉冻干粉的瓶中，黑曲霉液体培养基和黑曲霉冻干粉的比例为1：10，按100次/min振荡得到呈悬浮状的黑曲霉菌液；1.2.6用无菌吸管吸取步骤1.2.5所得的全部黑曲霉悬浮液，移植到察氏琼脂固体培养基中，在30℃培养72h，然后接种到察氏琼脂斜面培养基上，斜面培养72h，再接种到步骤1.2.4的黑曲霉液体培养基中，进行振荡频率100次/min的摇瓶培养72～96h，得到活菌数为1.0×10⁸～1.0×10⁹个/ml的黑曲霉发酵种子液；1.2.7将马铃薯200g/l、葡萄糖20g/l、水1000ml，作为酵母菌液体培养基；1.2.8用无菌吸管吸取步骤1.2.7所得的酵母菌液体培养基，滴入装有酵母菌冻干粉的瓶中，酵母菌液体培养基和酵母菌冻干粉的比例为1：10，按120次/min振荡，得到呈悬浮状的酵母菌液；1.2.9用无菌吸管吸取步骤1.2.8所得的全部酵母菌悬浮液，移植到麦芽汁琼脂固体培养基中，在30℃培养36～48h，然后接种到麦芽汁琼脂斜面培养基上，斜面培养36～48h，再接种到步骤1.2.7的液体培养基中，进行振荡频率为120次/min的摇瓶培养24～36h，得到活菌数为1.0×10⁸～1.0×10⁹cfu/ml的酵母菌发酵种子液；1.2.10将步骤1.2.3所得的乳酸菌发酵种子液、步骤1.2.6所得的黑曲霉发酵种子液和步骤1.2.9所得的酵母菌发酵种子液按体积比1:1:1混合，按5～10％的接菌量接种到100L装有复合菌发酵种子液培养基的种子罐中，培养72～96h，得到活菌数为1.0×10⁸～1.0×10⁹cfu/ml的复合菌发酵种子液，所述复合菌发酵种子液以5～10％的接菌量接种到100L种子罐中，是指发酵罐的装液量为发酵罐体积的70％，接菌量指的是这70％的5～10％；1.3将步骤1.2制备的复合菌发酵种子液按6％(v/w)接入步骤1.1的玉米蛋白粉中，调整含水量为50％，自然pH值，混合均匀后得到发酵基础料；1.4将步骤1.3所得的发酵基础料按40‑50cm的厚度摊铺在发酵池底，发酵池温度保持在30～35℃，厌氧发酵72～96h，得到发酵玉米蛋白粉；1.5将步骤1.4所得的发酵玉米蛋白粉在温度为50～55℃下烘干；1.6待步骤1.5的发酵玉米蛋白粉降至室温，即得复合菌固态发酵玉米蛋白粉成品。