[发明专利]一种基于F1蛋白的检测4型禽腺病毒抗体的间接免疫荧光试剂盒

摘要

本发明属于生物技术检测领域，具体涉及一种基于F1蛋白的检测4型禽腺病毒抗体的间接免疫荧光试剂盒。该试剂盒包括表达F1蛋白的293T细胞，FITC标记的羊抗鸡抗体，样品稀释液，洗涤液。本发明试剂盒具有良好的特异性；该试剂盒不仅能用于血清4型禽腺病毒感染状况流行病学调查，而且能有效用于监测免疫鸡群血清4型禽腺病毒抗体水平，用于评价免疫保护性抗体水平等。

主权项

一种基于F1蛋白的检测4型禽腺病毒抗体的间接免疫荧光试剂盒，其特征在于，包括表达F1蛋白的293T细胞，FITC标记的羊抗鸡抗体，样品稀释液，洗涤液；所述表达F1蛋白的293T细胞，是转染F1蛋白真核表达质粒的表达4型禽腺病毒F1蛋白的293T细胞；所述表达F1蛋白的293T细胞，通过下述步骤得到：(1)禽腺病毒F1蛋白真核表达质粒构建：以pcDNA3.1真核表达载体以及血清4型禽腺病毒基因组为模板，分别以SEQIDNO.1‑2和SEQIDNO.3‑4的序列为引物，分别PCR扩增出线性化的pcDNA3.1载体以及血清4型禽腺病毒F1蛋白基因SEQIDNo.5；随后利用重组酶ExnaseTMII将线性化的pcDNA3.1载体以及血清4型禽腺病毒F1蛋白基因的PCR产物进行快速体外重组克隆，重组克隆经序列验证后，命名为pcDNA3.1‑FAdV_F1；并用血清4型禽腺病毒阳性鸡血清通过westernblot验证F1蛋白在293T细胞中的表达。