[发明专利]一种食品中毒黄素的快速检测方法

摘要

本发明开发了一种基于固相萃取‑高效液相色谱法，快速检测食品中毒黄素残留的方法。食品样品采用纯水溶解、超声提取，以固相萃取小柱(HLB)对样品进行净化、实现目标分析物毒黄素的富集，通过体积分数为80％的甲醇水溶液作为洗脱液对固相萃取小柱进行洗脱，并经N2吹干，水溶解定容后得到上机液。该前处理条件实现了检测样品中毒黄素残留时，有效减少了干扰化合物对毒黄素准确定量的影响、消除了溶剂效应对毒黄素色谱行为的不利影响。流动相以甲醇和水梯度洗脱,增强了毒黄素在反相色谱柱中的保留，实现了样品色谱分析时毒黄素与其他干扰物的有效分离，从而达到准确定量分析的目的。该发明检测成本低，有毒试剂无消耗对环境友好，方法准确性好、灵敏度高、结果重现性好，适用于多种食品中毒黄素残留检测。

主权项

一种食品中毒黄素的快速检测方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)样品提取条件：称取20～25g样品和100mL蒸馏水混合后，超声提取20min，取提取液，5000r/min离心5min，得到上清液。(2)样品净化：取步骤1获得的上清液5.0mL，过HLB(6cc,200mg)小柱进行净化(上样前，小柱分别用5mL甲醇和5mL水进行活化)；净化后，将小柱用5mL水淋洗，挤干，弃去全部流出液。然后用5.0mL体积分数为80％的甲醇水溶液进行洗脱，得到洗脱液，将洗脱液用N2吹干，再1.0mL纯水定容，涡旋溶解后得到上机液。(3)色谱分析条件：将步骤2获得的上机液经配有DAD检测器的四元低压或二元高压液相色谱系统进行色谱分析，色谱柱：ODS反相色谱柱(例如ODS C18)，250*4.6mm,5μm；流动相为：甲醇与水梯度洗脱，体积比为(0～10min,7：93；10.1～20min，98：2；20.1～27min,7:93)；进样量：20μl；流速：1.0mL/min；柱温：30℃。检测波长：258nm。(4)样品定性分析：根据步骤3色谱分析得到的保留时间及特征光谱图，与标样的保留时间及特征光谱图进行比对，若两者吻合，则表明含有毒黄素。(5)样品定量分析：标样配制：将毒黄素溶于水，配制成浓度分别为0.05，0.1，0.2，0.4，1.0，2.0，5.0，10.0μg/ml系列标准使用液。以标样响应峰面积作为纵坐标，标样浓度为横坐标(μg/ml)，绘制校正曲线。根据步骤3色谱分析获得的响应峰面积，采用外标法，对样品中毒黄素含量进行定量分析。