[发明专利]一种分离、纯化重组蛋白的方法在审
| 申请号： | 201610281661.5 | 申请日： | 2016-04-29 |
| 公开（公告）号： | CN105884859A | 公开（公告）日： | 2016-08-24 |
| 发明（设计）人： | 朱建伟;路慧丽;李宁环;陈欢欢;江华;谢跃庆;史斯玮;张蕾;丁凯 | 申请（专利权）人： | 上海交通大学;美国杰科实验室有限公司;杰科（天津）生物医药有限公司 |
| 主分类号： | C07K1/30 | 分类号： | C07K1/30;C07K1/18;C07K1/16;C07K14/54 |
| 代理公司： | 上海翰鸿律师事务所 31246 | 代理人： | 李佳铭 |
| 地址： | 200240 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种分离、纯化重组蛋白的方法。该方法包括：在大肠杆菌系统表达目的蛋白的包涵体，用PEG沉淀法对变性包涵体进行纯化后，再进行变性、复性过程，并进一步采用色谱纯化技术，最终获得高纯度、高活性的重组蛋白产品。该方法提供了一种快速、低成本、高质量的重组蛋白的分离纯化方法。本发明提供的方法可用于表达、纯化生物大分子目的蛋白，具体包括细胞因子、酶、抗菌肽、抗体或抗体片段，尤其包括人IL‑15。本发明操作简便，成本低，可应用于大规模的工业生产。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 分离 纯化 重组 蛋白 方法 | ||
【主权项】：
一种分离、纯化重组蛋白的方法，所述方法具体包括如下步骤：(1)在大肠杆菌系统表达目的蛋白的包涵体；(2)将步骤(1)所得包涵体成份中加入变性剂进行变性，得到目的蛋白包涵体的变性液；(3)使用PEG沉淀法，纯化步骤(3)所得目的蛋白包涵体变相液，得到纯化后的目的蛋白；(4)在步骤(3)所得纯化后的目的蛋白中，再次加入变性液进行变性，获得纯化后的目的蛋白变性液；(5)将步骤(4)所得目的蛋白变性液通过复性手段进行复性，得到目的蛋白的复性溶液；(6)将步骤(5)所得复性后目的蛋白依次进行色谱纯化，得到终产品。
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