[发明专利]一种油酸聚乙二醇酯/无机盐双水相萃取分离藻蓝蛋白的方法在审
申请号: | 201610239712.8 | 申请日: | 2016-04-18 |
公开(公告)号: | CN105820236A | 公开(公告)日: | 2016-08-03 |
发明(设计)人: | 高志刚;汪世军;王峰 | 申请(专利权)人: | 东台市赐百年生物工程有限公司 |
主分类号: | C07K14/795 | 分类号: | C07K14/795;C07K1/14 |
代理公司: | 江苏银创律师事务所 32242 | 代理人: | 王纪营 |
地址: | 224242 江苏省*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种油酸聚乙二醇酯/无机盐双水相萃取分离藻蓝蛋白的方法,包括如下在步骤:(1)将螺旋藻采用反复冻融的方法破壁后收集上层清液得到藻蓝蛋白粗提液,(2)再向粗提液中加入油酸聚乙二醇酯和无机盐,经双水相萃取后分层,(3)取上相置于截留相对分子质量为5000的透析膜中透析20~30小时后得藻蓝蛋白水溶液,再于‑15~‑10℃冷冻干燥8~15小时得藻蓝蛋白粉末,其中油酸聚乙二醇酯中的PEG平均分子量为1000或2000。本发明对藻蓝蛋白的选择性高,分相容易且速度快,分配系数高,用设备常规,操作简便,分离效率高。藻蓝蛋白产品中纯度高,回收率91.2%以上。 | ||
搜索关键词: | 一种 油酸 聚乙二醇 无机盐 双水相 萃取 分离 蛋白 方法 | ||
【主权项】:
一种油酸聚乙二醇酯/无机盐双水相萃取分离藻蓝蛋白的方法,其特征在于包括如下在步骤:(1)反复冻融破壁:将螺旋藻粉加入水中浸泡6~8小时后,于‑20℃下冷冻2~5小时后,再于25℃融化,如此反复冻融3~4次破壁,再将所得溶液离心处理,收集上清液即为含藻蓝蛋白的粗提液;(2)双水相萃取:向在步骤(1)所得含藻蓝蛋白的粗提液中加入油酸聚乙二醇酯和无机盐,震荡混合后,静置8~15分钟,收集上相;(3)成品制备:将在步骤(2)所得上相在截留相对分子质量为5000的透析膜中透析20~30小时后得藻蓝蛋白水溶液,再于‑15~‑10℃冷冻干燥8~15小时得藻蓝蛋白粉末。
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