[发明专利]一种用半粒测定水稻直链淀粉和支链淀粉含量的方法

摘要

本发明属于食品检测技术领域，特别涉及一种用半粒测定水稻直链淀粉和支链淀粉含量的方法。该方法包括如下步骤：步骤1：稻米粉制备：取单粒稻谷手工脱壳后用刀片刮去种皮和糊粉层，得到精米，然后将其横切成两个半粒，取没有胚芽部分的半粒用碾磨棒碾磨成精米粉；步骤2：精米粉脱除脂肪和可溶性糖，称取步骤1得到精米粉与100%色谱纯甲醇混匀并于100℃加热10分钟后于10,000 g离心5分钟后收集沉淀物，此步骤重复2‑3次，并合并沉淀物；精米粉与甲醇的用量比为0.6mg/1.0ml；步骤3:糊化淀粉和直、支链分离；步骤4:凝胶渗透色谱仪器参数；步骤5：根据直链淀粉和支链淀粉的两成分出峰面积之比而直接得到直链淀粉/支链淀粉含量之比。 1

主权项

1.一种用半粒测定水稻直链淀粉和支链淀粉含量比的方法，其特征在于该方法包括如下步骤：

步骤1：稻米粉制备：取单粒稻谷手工脱壳后用刀片刮去种皮和糊粉层，得到精米，然后将其横切成两个半粒，取没有胚芽部分的半粒用碾磨棒碾磨成精米粉；

步骤2：精米粉脱除脂肪和可溶性糖

称取步骤1得到精米粉与100%色谱纯甲醇混匀并于100℃加热10分钟后于10,000 g离心5分钟后收集沉淀物，此步骤重复2‑3次，并合并沉淀物；精米粉与甲醇的用量比为0.6 mg/1.0 ml；

步骤3: 糊化淀粉和直、支链分离

步骤4: 凝胶渗透色谱仪器参数

采用TSK gel pwxl 3000和pwxl 4000串联双柱，采用0.1 mol/L 磷酸氢二钠和0.05 mol/L磷酸二氢钠为流动相，流速为1.0 ml/min, 柱温箱为40℃和采用示差检测器；

步骤5：根据直链淀粉和支链淀粉的两成分出峰面积之比而直接得到直链淀粉/支链淀粉含量之比。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：糊化的方法是沸水浴5‑10分钟或50℃烘箱2‑3小时或室温过夜至溶液清澈。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤3的具体过程为：取沉淀物加入0.25 mol/L NaOH溶液中，沉淀物与NaOH溶液的比例为50 mg：1.0 ml，糊化完全，混匀后加入适量 pH=4.0的0.5 mol/L 醋酸钠溶液，再加入适量酶活大于250 U的异淀粉酶于40℃ 反应2 hr以上，直至反应完全；然后，沸水加热5分钟，10,000 g 离心5‑10分钟，取上清液；加入适量离子交换树脂AG501‑X8，于50℃水浴摇床30 min, 后16000 g 离心10分钟，过0.45µm PVDF小柱，保持40℃后进行凝胶渗透色谱进样测定。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：醋酸钠溶液的加入量为糊化后得到产物重量的120‑130倍。