[发明专利]一种提升高环PAHs降解菌筛选效率的方法

摘要

一种提升高环PAHs降解菌筛选效率的方法，获取不同地理位置的PAHs污染土壤；分别利用低环和高环PAHs进行富集培养；分别利用低环和高环PAHs进行平板初筛；对所筛选的降解菌进行平板和液体降解验证；接种分离纯化的PAHs降解菌，通过平板和液体培养试验，判定降解菌对PAHs尤其是高环PAHs的降解效果。筛选方法经过改进之后，大大的提高了高环PAHs降解菌的筛选效率，有利于微生物菌种资源的后续开发利用。若按照传统筛选方法，只能获取较为单一的高环PAHs降解菌种；而通过改进的筛选方法，可一次性获取多种类的高环PAHs降解菌。

主权项

一种提升高环PAHs降解菌筛选效率的方法，其特征在于：1）获取不同地理位置的PAHs污染土壤；2）分别利用低环和高环PAHs进行富集培养：分别制备低环和高环PAHs为唯一碳源的无机盐液体培养基，按培养基的50wt.%添加采集土壤，对土壤中的PAHs降解菌进行富集培养1个月；3）分别利用低环和高环PAHs进行平板初筛：分别制备低环和高环PAHs的双层平板，将步骤2中的富集液分别涂布上述两种双层平板，产生高环富集‑低环平板和低环富集‑高环平板两种筛选组合类型；通过平板上的水解圈初步判定降解菌，并对形态上有所差异的降解菌进行分离纯化；4）对所筛选的降解菌进行平板和液体降解验证：制备不同环数的PAHs双层平板，分别含有蒽、菲、荧蒽、芘和苯并[a]芘为唯一碳源；制备含上述5种PAHs混合污染物的无机盐液体培养基，其中蒽、菲、荧蒽和芘为20 mg/L，苯并[a]芘为10 mg/L；接种步骤3中分离纯化的PAHs降解菌，通过平板和液体培养试验，判定降解菌对PAHs尤其是高环PAHs的降解效果；所述低环PAHs为蒽、菲；高环PAHs为芘、荧蒽、苯并[a]芘。