[发明专利]血清或血浆中25-羟基维生素D液相色谱串联质谱检测方法及试剂盒在审
| 申请号： | 201610220632.8 | 申请日： | 2016-04-11 |
| 公开（公告）号： | CN105911160A | 公开（公告）日： | 2016-08-31 |
| 发明（设计）人： | 何健;郭玉梅;宋晓涛 | 申请（专利权）人： | 北京洛奇临床检验所股份有限公司 |
| 主分类号： | G01N30/02 | 分类号： | G01N30/02;G01N30/06 |
| 代理公司： | 北京高文律师事务所 11359 | 代理人： | 徐江华;赵锐 |
| 地址： | 102206 北京市海淀*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种血清或血浆中25‑羟基维生素D液相色谱串联质谱检测方法，包括如下步骤：(1)样本前处理：往离心管内加入内标溶液10μl和人血清200μl，混合均匀，然后加600μl丙酮，混合均匀，低温静置15分钟后置于离心机上，以13000rpm转速离心5分钟；取上清液于第二离心管中，50℃氮气吹干后加入200μl乙腈复溶，混合均匀后置于离心机上，以13000rpm转速离心2‑4分钟，取上清液；(2)检测方法为液相色谱串联质谱法，其中采用的是多反应监测MRM扫描方式。本发明通过对前处理方法的改良，前处理更加简单、快捷，可实现批量处理。 | ||
| 搜索关键词： | 血清 血浆 25 羟基 维生素 色谱 串联 检测 方法 试剂盒 | ||
【主权项】：
血清或血浆中25‑羟基维生素D液相色谱串联质谱检测方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)样本前处理：往离心管内加入内标溶液10μl和人血清或血浆200μl，混合均匀，然后加400‑800μl丙酮，混合均匀，低温静置15‑25分钟后置于离心机上，以13000rpm转速离心5分钟；取上清液于第二离心管中，氮气吹干后加入200μl乙腈复溶，混合均匀后置于离心机上，以13000rpm转速离心2‑4分钟，取上清液；(2)检测方法为液相色谱串联质谱法，其中采用的是多反应监测MRM扫描方式，所述色谱条件如下：色谱柱：4.6×30mm，3.5μm；初始流动相的流速为1ml/min，柱温30℃，检测时间为6min，进样量为50μl；采用梯度洗脱方式，洗脱参数见表1；表1为梯度洗脱参数![]()
所述流动相A为体积比为0.05％甲酸水溶液，流动相B为纯甲醇；25‑羟基维生素D3的保留时间为3.3min；25‑羟基维生素D2的保留时间为3.5min；所述多反应监测MRM质谱相关参数见表2，表2为质谱参数![]()
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