[发明专利]液体中激光诱导增强拉曼光谱的检测与分选方法及其装置

摘要

本发明公开了一种液体中激光诱导增强拉曼光谱的检测与分选方法及其装置。本发明通过诱导光聚焦在悬浮的待测样品上，在液体中形成三维光阱，并富集金属纳米颗粒于待测样品的表面，通过激发光与诱导光焦点重合，形成激光诱导增强拉曼信号；本发明的实现方法简便，光谱增强效果明显，适合于液体环境中的生物样品原位拉曼光谱快速检测；需要待测样品与金属纳米颗粒共同孵育，特别适用于疾病、疫情、食品安全等快速检测领域；大大降低了金属纳米颗粒对生物样品的毒性损伤，从而能最大程度地反应活细胞真实生理状态；本发明形成的光镊能够进行分选、提取和洗脱，实现单个活细胞的拉曼光谱识别和分选功能，有利于生物样品的后续研究。

主权项

1.一种液体中激光诱导增强拉曼光谱的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括以下步骤：1)样品制备：准备待测样品，并制备金属纳米颗粒，将待测样品和金属纳米颗粒均匀混合后，溶于盛放在透明的样品池中的液体中；2)打开照明光装置，照明光装置发射出明场光，照射在样品池中，经物镜聚焦后，分别经第一和第二二向色镜后，成像在成像装置上，并将图像传输至监视器，实时显示样品池内部的待测样品；3)关闭照明光装置；4)打开诱导光装置，诱导光装置发出近红外激光作为诱导光，经合束镜后，再经第一二向色镜进入物镜，由高数值孔径的物镜高度聚焦，焦点位于悬浮在样品池中的待测样品上，在液体中形成三维光阱，悬浮固定待测样品，并富集金属纳米颗粒于待测样品的表面；5)打开激发光装置，激发光装置发出可见光波段的激光，作为激发光，经合束镜与诱导光合束后，经第一二向色镜进入物镜，由高数值孔径的物镜聚焦，焦点同样位于样品池中的待测样品上，激发富集在待测样品表面的纳米金属颗粒产生局域表面等离子共振LSPR效应，同时激发待测样品产生拉曼信号，拉曼信号与局域表面等离子共振LSPR效应相互作用，形成激光诱导增强拉曼信号；6)激光诱导增强拉曼信号由物镜聚焦，经第一二向色镜与诱导光和激发光分路，经第二二向色镜与照明光分路，经过激发光滤波器，再经聚焦透镜聚焦后，进入拉曼光谱仪，得到激光诱导增强拉曼光谱；7)拉曼光谱仪将数据传输至计算机，分析激光诱导增强拉曼光谱得到待测样品的信息。