[发明专利]一种抑制植物基因转录的方法有效

专利信息
申请号: 201610186749.9 申请日: 2016-03-29
公开(公告)号: CN105802992B 公开(公告)日: 2019-08-20
发明(设计)人: 林金星;林森;赵媛媛 申请(专利权)人: 中国科学院植物研究所
主分类号: C12N15/82 分类号: C12N15/82;C12N15/11;A01H6/20
代理公司: 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 代理人: 关畅;白艳
地址: 100093 北京市海淀*** 国省代码: 北京;11
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摘要: 发明公开了一种抑制植物基因转录的方法。本发明提供了一种抑制植物基因转录的方法,包括如下步骤:1)选取靶基因中大于等于15bp的核苷酸序列作为靶序列;2)根据所述靶序列中的每个核苷酸的排列顺序列出识别所述靶序列的串联模块DNA片段序列,制备所述串联模块DNA片段;本发明的实验证明,本发明利用TALE特异性识别DNA碱基的能力,以Unit Assembly的方法为基础进行了TALE载体的构建,在植物中表达的TALE蛋白与靶定DNA特异性结合后,会干扰靶基因的正常转录,从而造成其转录水平降低。
搜索关键词: 一种 抑制 植物 基因 转录 方法
【主权项】:
1.一种抑制拟南芥中靶基因DET2转录的方法,包括如下步骤:1)选取靶基因DET2中大于等于15bp的核苷酸序列作为靶序列;2)根据所述靶序列中的每个核苷酸的排列顺序列出识别所述靶序列的串联模块DNA片段序列,制备所述串联模块DNA片段;所述串联模块DNA片段由与靶序列中核苷酸数目一致的模块DNA依次连接得到;识别核苷酸A的模块DNA为NI模块DNA,识别核苷酸T的模块DNA为NG模块DNA、识别核苷酸G的模块DNA为HD模块DNA,识别核苷酸C的模块DNA为NN模块DNA;3)将所述串联模块DNA片段和位于其两端的TALE N末端片段及TALE C末端片段导入目的植物中,实现抑制植物中靶基因转录;所述NI模块DNA的核苷酸序列为序列1;所述NG模块DNA的核苷酸序列为序列2;所述HD模块DNA的核苷酸序列为序列3;所述NN模块DNA的核苷酸序列为序列4;所述TALE N末端片段的核苷酸序列为序列5;所述TALE C末端片段的核苷酸序列为序列6。
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