[发明专利]一种甜高粱组织培养快速育苗的方法

摘要

本发明公开了一种甜高粱组织培养快速育苗的方法，涉及植物组织培养技术领域。采用甜高粱种子组织培育方法，既可繁殖优良品种，又可从种子实生苗中选取优异的株苗用作遗传转化实验，避免花费大量金钱和精力。本发明方法可行，操作简单，可以为人们进行杂交育种及遗传转化实验，提供了一种有效的途径。缩短了甜高粱的培养周期，利用正交实验，摸索出能诱导甜高粱愈伤组织形成的最适激素配比，能在较大程度上促进愈伤及生芽、生根的形成，缩短甜高粱的培养周期。

主权项

一种采用甜高粱种子组织培养快速育苗方法，其特征在于按照下述步骤进行：（1）种子处理 a、将甜高粱种子在10%v/v NaClO中浸泡2 h，期间不停搅拌； b、用蒸馏水清洗3遍后，于暗处静置过夜； c、用10%v/v NaClO浸泡20 min； d、在超净工作台中，用无菌水清洗3~5遍，将其接种在愈伤组织诱导培养基上进行愈伤诱导培养；（2）愈伤组织诱导将接种的培养基转移至培养箱，每天光照16 h，光照强度1400‑1500 lux（勒克斯），温度 25 ℃ ±1 ℃ ，无菌条件下培养3~5 d后，种子开始萌动，1周后开始有愈伤形成，并伴随有新芽或者新叶的形成，诱导愈伤选用培养基为 MS基础培养基，补充2,4‑D 1~3mg/L，6‑BA 1~3mg/L，蔗糖 30g/L，脯氨酸 0.7~1g/L, KH2PO4 1~2g/L ,CuSO4 1~3µM, pH为5.8；（3）生芽生根培养4周后，在无菌条件下将新长成的愈伤组织转移至生根培养基上，温度 25 ℃±1 ℃，光照 16 h，光强1500~2000 lux，7~10 d 后开始生根，且速度较快，2周后，将生根的甜高粱苗进行过渡栽培；步骤（3）生根培养基选用MS基础培养基，补充IAA 1~3mg/L ，蔗糖 30g/L，脯氨酸 0.7~1g/L, KH2PO4 1~2g/L ,CuSO4 1~3µM, pH为5.8。