[发明专利]一种牡丹组织培养再生的方法

摘要

本发明公开了一种牡丹组织培养再生的方法，包括以下步骤：1)将牡丹种子用浓硫酸浸泡处理、冲洗并消毒；2)培养所述牡丹种子产生胚根，然后诱导愈伤组织及体细胞胚；3)所述体细胞胚再生形成次生体细胞胚团；4)将所述次生体细胞胚团分化形成子叶胚；5)所述子叶胚进一步分化形成不定根；6)将分化形成不定根的外植体炼苗并形成完整植株。使用本发明的方法，在炼苗1个月后，植株成活率可达到95％，叶8‑10片，高6‑10cm，可获得大批组培苗满足种植需要。此外，该方法育苗速度快、效率高、受季节和环境影响小，便于随时进行大规模育苗种植，在牡丹新品种改良中有重要应用。

主权项

1.一种牡丹组织培养再生的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)将牡丹种子用浓硫酸浸泡处理、冲洗并消毒；2)培养所述牡丹种子产生胚根，然后诱导愈伤组织及体细胞胚；3)所述体细胞胚再生形成次生体细胞胚团；4)将所述次生体细胞胚团分化形成子叶胚；5)所述子叶胚进一步分化形成不定根；6)将分化形成不定根的外植体炼苗并形成完整植株；诱导愈伤组织使用的诱导培养基组分为：蔗糖30g/L，MSB 4.44g/L，2,4‑D 40mg/L，凝胶2g/L，pH值7.0；所述体细胞胚再生形成次生体细胞胚团使用的继代培养基组分为：蔗糖30g/L或60g/L，MSB 4.44g/L,凝胶2g/L，2,4‑D 20mg/L，pH值7.0；所述次生体细胞胚团分化形成子叶胚使用的分化培养基组分为：MSB 4.44g/L,麦芽糖60g/L，活性炭5g/L，2g/L凝胶，pH值5.7；所述子叶胚进一步分化形成不定根使用的生根培养基组分为：MSB 4.44g/L,蔗糖30g/L，2g/L凝胶，pH值5.7。