[发明专利]重组羰基还原酶突变体ReCR-Mut、编码基因、工程菌及应用有效

专利信息
申请号: 201610132453.9 申请日: 2016-03-09
公开(公告)号: CN105602913B 公开(公告)日: 2019-02-01
发明(设计)人: 应向贤;汪钊;黄美娟;范雅君 申请(专利权)人: 浙江工业大学
主分类号: C12N9/04 分类号: C12N9/04;C12N15/53;C12N1/21;C12P17/12;C12R1/19
代理公司: 杭州天正专利事务所有限公司 33201 代理人: 黄美娟;李世玉
地址: 310014 浙*** 国省代码: 浙江;33
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摘要: 发明公开了一种重组羰基还原酶突变体ReCR‑Mut、编码基因、工程菌及其应用,所述突变体ReCR‑Mut是将SEQ ID NO.2所示氨基酸序列中第54位酪氨酸突变为苯丙氨酸获得的;与野生型ReCR相比,突变体ReCR‑Mut具有更高的酶活力和催化效率;突变体ReCR‑Mut还原N‑Boc‑3‑哌啶酮的比酶活力是野生型ReCR的1.42倍,突变体ReCR‑Mut对N‑Boc‑3‑哌啶酮的kcat/Km值是野生型的1.37倍;利用突变体ReCR‑Mut为生物催化剂,以仲辛醇为辅底物和有机相,利用NAD+为辅酶高效不对称合成光学纯(S)‑N‑Boc‑3‑哌啶醇;在优选两相体系中,300g/L N‑Boc‑3‑哌啶酮经整细胞法催化其不对称还原反应12小时,产物(S)‑N‑Boc‑3‑哌啶醇的产物e.e.值>99%,得率为93.9%;与野生型羰基还原酶ReCR作为生物催化剂相比,产物得率提高了11.9%。
搜索关键词: 重组 羰基 还原酶 突变体 recr mut 编码 基因 工程 应用
【主权项】:
1.一种重组羰基还原酶突变体ReCR‑Mut,其特征在于所述突变体ReCR‑Mut是将SEQ ID NO.2所示氨基酸序列中第54位酪氨酸突变为苯丙氨酸获得的。
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