[发明专利]重组羰基还原酶突变体ReCR-Mut、编码基因、工程菌及应用有效
申请号: | 201610132453.9 | 申请日: | 2016-03-09 |
公开(公告)号: | CN105602913B | 公开(公告)日: | 2019-02-01 |
发明(设计)人: | 应向贤;汪钊;黄美娟;范雅君 | 申请(专利权)人: | 浙江工业大学 |
主分类号: | C12N9/04 | 分类号: | C12N9/04;C12N15/53;C12N1/21;C12P17/12;C12R1/19 |
代理公司: | 杭州天正专利事务所有限公司 33201 | 代理人: | 黄美娟;李世玉 |
地址: | 310014 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了一种重组羰基还原酶突变体ReCR‑Mut、编码基因、工程菌及其应用,所述突变体ReCR‑Mut是将SEQ ID NO.2所示氨基酸序列中第54位酪氨酸突变为苯丙氨酸获得的;与野生型ReCR相比,突变体ReCR‑Mut具有更高的酶活力和催化效率;突变体ReCR‑Mut还原N‑Boc‑3‑哌啶酮的比酶活力是野生型ReCR的1.42倍,突变体ReCR‑Mut对N‑Boc‑3‑哌啶酮的kcat/Km值是野生型的1.37倍;利用突变体ReCR‑Mut为生物催化剂,以仲辛醇为辅底物和有机相,利用NAD+为辅酶高效不对称合成光学纯(S)‑N‑Boc‑3‑哌啶醇;在优选两相体系中,300g/L N‑Boc‑3‑哌啶酮经整细胞法催化其不对称还原反应12小时,产物(S)‑N‑Boc‑3‑哌啶醇的产物e.e.值>99%,得率为93.9%;与野生型羰基还原酶ReCR作为生物催化剂相比,产物得率提高了11.9%。 | ||
搜索关键词: | 重组 羰基 还原酶 突变体 recr mut 编码 基因 工程 应用 | ||
【主权项】:
1.一种重组羰基还原酶突变体ReCR‑Mut,其特征在于所述突变体ReCR‑Mut是将SEQ ID NO.2所示氨基酸序列中第54位酪氨酸突变为苯丙氨酸获得的。
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