[发明专利]一种醛酮还原酶突变体、基因、工程菌及其应用有效
| 申请号： | 201610124451.5 | 申请日： | 2016-03-04 |
| 公开（公告）号： | CN105671010B | 公开（公告）日： | 2019-01-08 |
| 发明（设计）人： | 王亚军;罗希;沈炜;郑裕国 | 申请（专利权）人： | 浙江工业大学 |
| 主分类号： | C12N9/02 | 分类号： | C12N9/02;C12N15/53;C12N15/70;C12N1/21;C12P13/00 |
| 代理公司： | 杭州天正专利事务所有限公司 33201 | 代理人： | 黄美娟;李世玉 |
| 地址： | 310014 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种醛酮还原酶突变体、基因、工程菌及在制备6‑氰基‑(3R,5R)‑二羟基己酸叔丁酯中的应用，所述醛酮还原酶突变体是将SEQ ID NO.1所示氨基酸序列的第295位、第296位进行单突变或双突变获得的；与野生型醛酮还原酶相比，本发明提供的Kluyveromyces lactis醛酮还原酶突变体，不对称还原6‑氰基‑(5R)‑羟基‑3‑羰基己酸叔丁酯催化比酶活大幅度提高，从0.56U/mg提高到7.95U/mg，提高了14.2倍，并且产物6‑氰基‑(3R,5R)‑二羟基己酸叔丁酯非对映体选择性维持在99.5％以上；本发明所获得的多个醛酮还原酶突变体特别适合于催化6‑氰基‑(5R)‑羟基‑3‑羰基己酸叔丁酯不对称还原制备6‑氰基‑(3R,5R)‑二羟基己酸叔丁酯，具有较好的工业应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 还原酶 突变体 基因 工程 及其 应用 | ||
【主权项】：
1.一种醛酮还原酶突变体，其特征在于所述醛酮还原酶突变体为下列之一：(1)将SEQ ID NO.1所示氨基酸序列的第295位酪氨酸突变为色氨酸，氨基酸序列为SEQ ID NO 2所示；(2)将SEQ ID NO.1所示氨基酸序列的第295位酪氨酸突变为色氨酸，并将第296位色氨酸突变为亮氨酸，氨基酸序列为SEQ ID NO 3所示。
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