[发明专利]一种促进邓恩桉组培苗生根方法

摘要

本发明提供一种促进邓恩桉组培苗生根方法，包括壮苗培养、不定根诱导、不定根伸长和苗木移栽的工序，将邓恩桉组培继代丛芽转接到培养基Ⅰ中进行壮苗培养，然后采用两步生根法，将获得的继代芽依次接种于培养基Ⅱ和培养基Ⅲ中获取生根的再生植株，最后移栽至育苗基质中培育，获得邓恩桉组培生根苗。本发明基于邓恩桉生根困难机理，在培养基中附加促根性的多元酚，使培养基更科学，更易促使邓恩桉生根，效果显著；使用该方法的邓恩桉组培苗的生根率达93.2%，移栽成活率为94.0%，具有明显的先进性，并具有较好的经济、社会效益和生态效益。

主权项

一种促进邓恩桉组培苗生根方法，其特征在于：包括壮苗培养、不定根诱导、不定根伸长和苗木移栽的工序，将邓恩桉组培继代丛芽转接到培养基Ⅰ中进行壮苗培养，然后采用两步生根法，将获得的继代芽依次接种于培养基Ⅱ和培养基Ⅲ中获取生根的再生植株，最后移栽至育苗基质中培育，获得邓恩桉组培生根苗；其具体操作步骤如下：（1）壮苗培养：将2.0‑3.0 cm高的邓恩桉组培继代丛芽转接到培养基Ⅰ中，在特定的光温条件下进行壮苗培养25‑30 d，得到继代芽；所述的培养基Ⅰ其原料含量为：NAA 0.05‑0.15 mg·L‑1、蔗糖30000 mg·L‑1和改良MS培养基；所述的光温条件为：温度25±1℃，光源650 nm红光:450 nm蓝光=1.5:1的红蓝LED灯，光照强度1500‑2000 lx，光照时间16 h/d；（2）不定根诱导：单个切下生长健壮、叶片舒展、高1.0‑1.5 cm的继代芽，接种培养基Ⅱ中培养10‑15 d，诱导继代芽不定根原基发生；所述的培养基Ⅱ其原料含量为：ABT1 0.5‑2.5 mg·L‑1、IBA 0‑1.0 mg·L‑1、间苯三酚50‑100 mg·L‑1、蔗糖15000 mg·L‑1和1/2改良MS培养基；（3）不定根伸长：将肉眼可见的不定根继代芽作为外植体，转接入培养基Ⅲ中，促进继代芽不定根的表达与伸长，得到再生植株；所述的培养基Ⅲ其原料含量为：间苯三酚 100‑200 mg·L‑1、抗坏血酸 100‑250 mg·L‑1、蔗糖15000 mg·L‑1和1/2改良MS培养基；（4）苗木移栽：将已生根的再生植株移栽于育苗基质中培育，按常规方法喷水保湿，获得邓恩桉组培生根苗；育苗基质是由黄泥炭土、蛭石和珍珠岩按体积比1:1:1的比例均匀混合而成；以上所述的改良MS培养基的基本组成为：KNO3 1650 mg·L‑1；NH4NO3 280 mg·L‑1；CaCl2·2H2O 460 mg·L‑1；MgSO4·7H2O 370 mg·L‑1；Ca(NO3)2·4H2O 500 mg·L‑1；KH2PO4 340 mg·L‑1；MnSO4·H2O 25 mg·L‑1；ZnSO4·7H2O 10 mg·L‑1；CuSO4·5H2O 0.1 mg·L‑1；H3BO3 10 mg·L‑1；Na2MoO4·2H2O 0.05 mg·L‑1；CoCl2·6H2O 0.025 mg·L‑1；维生素B1 1.0 mg·L‑1；维生素B6 0.5 mg·L‑1；烟酸 0.5 mg·L‑1；甘氨酸 2.0 mg·L‑1；肌醇 100 mg·L‑1。