[发明专利]交联pH响应跨膜小肽的金纳米星材料及其应用

摘要

本发明公开了一种pH响应跨膜小肽的金纳米星材料，首先通过将氨基‑聚乙二醇‑巯基与马来酰亚胺‑聚乙二醇修饰的pHLIP交联，然后修饰到采用优化的湿化学法合成的金纳米星表面制备得到。穿膜小肽pHLIP在肿瘤pH酸性环境下折叠并插入细胞膜形成稳定的跨膜α螺旋，并协助交联的材料进入细胞，提高细胞对金纳米星的吞噬量。经近红外激光照射后，金纳米星吸收光能转化成热能，短时间内迅速提高材料富集区的温度，利用热效应杀死肿瘤细胞，避免引起全身毒性。体外研究发现，该金纳米星材料在酸性环境下可特异性的靶向乳腺癌细胞，且光热治疗后显著抑制肿瘤细胞生长。因pHLIP在肿瘤酸性环境均能跨膜插入细胞膜，交联pHLIP的金纳米星还可广泛应用于其他临床肿瘤的光热治疗。

主权项

一种交联pH响应跨膜小肽的金纳米星材料，其特征在于，其通过如下方法制备得到：（1）用水分别配制2 mM马来酰亚胺‑聚乙二醇修饰的小肽pHLIP溶液和2 mM 氨基‑聚乙二醇‑巯基溶液，将两者按照摩尔比1: 0.8~1混合均匀，得到混合液，其中，所述小肽pHLIP是序列为ACEQNPIYWARYADWLFTTPLLLLDLALLVDADEGTG的pHLIP肽；（2）2.5 mL 0.01 M的氯金酸加入到97.5 mL的水中，加热搅拌5 min~10 min，随后加入3 mL 1wt % 的柠檬酸三钠，加入后溶液颜色由原来的无色慢慢变成暗红色，此时停止加热和搅拌，制得柠檬酸钠金溶液；（3）0.25 mL 0.01 M的氯金酸溶液溶解在10 mL水中，然后加入0.1 mL上述（2）的柠檬酸钠金溶液，在室温搅拌下，向该混合液中同时加入0 .05 mL 0.1 M硝酸银和0.04 mL 0.01 M抗坏血酸，继续搅拌使溶液颜色由浅粉变成深蓝色，反应5~10min后加入0.02 mL步骤（1）得到的混合物，然后将得到的产物离心、洗涤、弃上清，并分散至1~2 mL水中，形成交联pH响应跨膜小肽的金纳米星材料储备液，其中离心条件为：相对离心力为7500~8000，离心10~15分钟。