[发明专利]一种猪伪狂犬病毒变异毒株的PCR鉴别方法在审
| 申请号： | 201610113660.X | 申请日： | 2016-02-29 |
| 公开（公告）号： | CN105648116A | 公开（公告）日： | 2016-06-08 |
| 发明（设计）人： | 姜平;孙涛;白娟;王先炜;李玉峰 | 申请（专利权）人： | 南京农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 济南泉城专利商标事务所 37218 | 代理人： | 刘丽 |
| 地址： | 210014 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明涉及生物毒株鉴别技术领域，特别涉及一种猪伪狂犬病毒变异毒株的PCR鉴别方法，提取待鉴别病毒DNA，进行第一步扩增，扩增出两条条带的为变异株或HB98疫苗毒株，扩增出1条条带的为经典毒株；扩增出两条条带的病毒DNA再进行第二步扩增，扩增产物分子量大小为293bp的为变异株,扩增产物分子量大小为239bp的为HB98疫苗毒株。第一步PCR的敏感度可以达到2-20TCID50病毒量或0.5ng/ml质粒量，而第二步PCR敏感度达到50TCID50病毒量或者100ng/ml质粒量。该敏感度可以有效的检测出临床病料中是否有伪狂犬病毒感染，并区分出伪狂犬病毒经典毒株或者变异毒株感染，并且准确率高。 | ||
| 搜索关键词： | 种猪 狂犬病毒 变异 pcr 鉴别方法 | ||
【主权项】：
一种猪伪狂犬病毒变异毒株的PCR鉴别方法，其特征在于提取待鉴别病毒DNA，使用引物1F‑C、1F‑V、1R进行第一步扩增，扩增出两条条带的为变异株或HB98疫苗毒株，扩增出1条条带的为经典毒株；扩增出两条条带的病毒DNA再使用引物2F和2R进行第二步扩增，扩增产物分子量大小为293bp的为变异株,扩增产物分子量大小为239bp的为HB98疫苗毒株；引物1F‑C、1F‑V、1R、2F和2R序列如下：1F‑C：5’‑GAGCCCGTCTCGGGGACGAC‑3’，1F‑V：5’‑GCTGCTCGAGGCGGACCACGTC‑3’，1R：5’‑CCGGTGCGCGTGCCTGTGG‑3’，2F: 5’‑GATGCGGTCACCGTCGGGTTT‑3’，2R: 5’‑CCGCCGCTCAGCCCCCATCGT‑3’。
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