[发明专利]简单、灵敏检测核酸外切酶III活性的探针及其应用

摘要

本发明公开了一种简单、灵敏检测核酸外切酶III活性的探针及其应用，该探针是从5'端到3'端由3～6个重复的CG碱基序列构成的DNA，且3'端标记荧光基团。本发明探针能自杂交成为双链DNA，G碱基与荧光基团之间发生光电子诱导转移，使探针荧光被熄灭。当检测体系中含有核酸外切酶III时，它能沿3'→5'方向逐步催化水解双链DNA生成单核苷酸，使荧光基团与DNA分离而游离在溶液中，荧光基团的荧光得以恢复，通过检测体系的荧光强度即可实现核酸外切酶III活性的定量检测。采用本发明探针检测核酸外切酶III活性的方法简单、快捷、灵敏，且具有很好的特异性，检出限可达到5×10‑4U/mL。本发明探针还可用于核酸外切酶III抑制剂的筛选。

主权项

1.一种简单、灵敏度检测核酸外切酶III活性的探针，其特征在于：该探针是从5'端到3'端由4个重复的CG碱基序列构成的DNA，且3'端标记荧光基团，所述荧光基团为6‑羧基荧光素、羧基四甲基罗丹明、2,7‑二甲基‑4,5‑二氯‑6‑羧基荧光素、四氯‑6‑羧基荧光素、六氯‑6‑甲基荧光素、德克萨斯红、3H‑吲哚菁染料、7‑氨基‑4‑甲基香豆素、二乙胺基香豆素、萘并荧光素中的任意一种。