[发明专利]干细胞生物活性组合物及其制备方法与应用

摘要

本发明公开了一种干细胞生物活性组合物及其制备方法与应用，所述干细胞生物活性组合物含有1.69‑22.24pg/mL EGF、2443.17‑4459.43pg/mL bFGF、1.44‑134.36pg/mL beta‑NGF、1.55‑355.14pg/mL VEGF、11.87‑159.70pg/mL PDGF‑DD、135.79‑688.13pg/mL KGF、1176.99‑3825.79pg/mL TGF‑β1，所述干细胞生物活性组合物具有高纯度、高产量、高生物活性。

主权项

1.一种干细胞生物活性组合物，其特征在于，含有：18.47pg/mL EGF、4447.00pg/mLbFGF、32.66pg/mL beta-NGF、27.77pg/mL VEGF、77.04pg/mL PDGF-DD、688.13pg/mL KGF、3312.99pg/mL TGF-β1；/n其中，所述干细胞生物活性组合物是通过如下方法获得的：/n(1)利用培养基，对间充质干细胞和脂肪基质细胞进行非接触式共培养，/n(2)收集含有间充质干细胞的培养液，/n(3-1)将所述含有间充质干细胞的培养液放入-20℃冷冻后，放入5℃中进行解冻，以便获得冻融后的含有间充质干细胞的培养液，/n(3-2)在振幅50％的情况下，对所述冻融后的含有间充质干细胞的培养液进行超声50min，收集并混合超声后的液体，以便获得超声后的含有间充质干细胞的培养液，/n(3-3)将所述超声后的含有间充质干细胞的培养液在10000rpm下离心30min后，于0.22μm微孔滤膜进行过滤，并收集上清液，所述上清液构成所述干细胞活性组合物；/n所述非接触式共培养采用非接触培养装置，所述非接触培养装置包括：/n培养皿，所述培养皿中限定出下室，所述脂肪基质细胞接种于所述下室，/nTranswell，所述Transwell中限定出上室，其中，所述Transwell具有PET膜，所述PET膜使所述上室和所述下室呈流体连通，所述间充质干细胞接种于所述上室。/n