[发明专利]一种乳酸链球菌素的制备方法

摘要

本发明公开了一种乳酸链球菌素的制备方法，属于乳酸链球菌素制备技术领域。本发明以白萝卜和鳅鱼为原料，首先通过沸煮成浆后，冷却发酵，随后将发酵固体物进行发霉，收集发酵渣霉菌，发酵液则浸泡发酵渣霉菌，从而得到悬浮菌丝液，之后将得到的悬浮菌丝液静置分层，减压得滤液后向其中加入硅胶并再次过滤，最后将滤液真空干燥，从而得到一种乳酸链球菌素的制备方法。实例证明，本发明方法操作简便，步骤简练，原料易得，单位成本低，在制备的过程中不采用有机溶剂萃取或洗脱，不会影响产品质量且对人体无害，最终使得制得的乳酸链球菌素工艺盐含量低、产品纯度高于75％，且产品收率高于85％，适合大规模生产应用。

主权项

一种乳酸链球菌素的制备方法，其特征在于具体操作步骤为：（1）取8～10条个体重量在35～45g的鳅鱼， 经宰杀、去尾、去头、去内脏后，用清水反复清洗，去除残留的污物，随后将洗后的鳅鱼均匀切成长2～5cm的鱼块，再用无菌水淋洗干净，放入菠萝筛中于无菌通风环境下自然风干；（2）挑选600～800g无霉斑、无病虫害的冬至时节白萝卜，洗净泥沙，用刀削去表皮后，均匀切成长1～2cm，宽2～3cm的萝卜块，在开水中烫3～5min后取出放入煮锅中，并向其中加入上述步骤得到的鳅鱼块以及白萝卜质量2～3倍的清水，混合均匀，在90～110℃下沸煮，其中在沸煮过程中每隔20min用筷子搅拌混合物1～2min，直至混合物完全熟烂成浆为止，随后将煮后的混合物取出，待其自然冷却后，倒入5L的发酵罐中，在温度为38～58℃，空气相对湿度为65～68％下，密封发酵；（3）密封发酵2～3个月后，将上述发酵物放入卧式离心机中，以1200～1250r/min转速下离心分离10～15min，去渣，取上层液体放入2L陶瓷罐中，备用；（4）同时将离心分离所得离心物敞开放置于空气中，放在温度为28～32℃，空气相对湿度为65～68％处，任其自然长菌，待发酵渣变质发霉长出青褐色菌丝时，用消毒后的棉签刮下菌丝放入盛有300mL无水乙醇的烧杯中，收集发酵渣霉菌；（5）选取上述步骤（3）得到的备用发酵液，用质量浓度为10％醋酸调节pH值为5.3～6.2，再与上述无水乙醇浸泡的发酵渣霉菌混合，得到菌丝悬浮液，随后将得到的菌丝悬浮液静置过夜，待分层后分离，得上层液，经减压过滤，收集过滤液；（6）在上述得到的过滤液中加入过滤液质量3％的硅胶，搅拌均匀，静置15～20min，过滤得滤液，将滤液真空干燥，即可得到一种乳酸链球菌素。