[发明专利]真核微生物抗苯菌灵标记突变株的选育方法在审
申请号: | 201610028320.7 | 申请日: | 2016-01-15 |
公开(公告)号: | CN105543212A | 公开(公告)日: | 2016-05-04 |
发明(设计)人: | 赵喜华;易拾;涂宗财 | 申请(专利权)人: | 江西师范大学 |
主分类号: | C12N13/00 | 分类号: | C12N13/00;C12N15/01 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 330000 *** | 国省代码: | 江西;36 |
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摘要: | 本发明涉及一种真核微生物抗苯菌灵标记突变株的选育方法,针对真核微生物具体采用紫外诱变方法获得抗苯菌灵标记的突变株。通过本发明方法可以获得抗50μg/mL苯菌灵突变株。本发明所述的抗苯菌灵突变菌株的选育方法,可广泛应用于青霉属等真核微生物抗性标记的筛选。 | ||
搜索关键词: | 微生物 抗苯菌灵 标记 突变 选育 方法 | ||
【主权项】:
一种真核微生物抗苯菌灵标记突变株的选育方法,其特征在于:先将真核微生物孢子紫外诱变,紫外诱变程序为距紫外线距离10‑30cm、诱变时间,40‑120s;选育方法为:步骤一、真核微生物孢子菌悬液的制备,其包括:将真核微生物接种于PDA培养基中28℃培养5‑7天,用50mL去离子水洗脱孢子,将孢子放入装有已灭菌玻璃珠的三角瓶中,于200rpm、28℃摇20min,再用已灭菌的含有棉花的漏斗过滤除去菌丝体和培养基,获得单孢子悬浮液;步骤二、将获得的单孢子悬浮液距紫外线距离10‑30cm,诱变时间为40‑120s获得突变株;步骤三、取100μL的稀释菌液涂布于初筛选培养基(含50μg/mL苯菌灵)上,初筛获得抗苯菌灵的突变株;步骤四、将步骤三获得的突变株传接3代于含有50μg/mL苯菌灵的初筛培养基上,防止回复突变。
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