[发明专利]肝脏诱癌剂及其制备方法

摘要

本发明属于生物技术领域，涉及一种肝脏诱癌剂、肝脏诱癌剂的制备方法以及基于肝脏诱癌剂建立原发性肝癌模型的方法。其中，肝脏诱癌剂是DEN非水溶液，例如是DEN油溶液或者DEN麻油溶液。本发明通过将DEN溶于麻油经口给药增加了小鼠服药的顺应性，克服了DEN水溶造模小鼠之间的个体差异；在二十周时，DEN水溶组及经口高剂量组小鼠肉眼均可见肿瘤结节，但1次/周经口给药组小鼠死亡率最低，即长期低频给药能大大降低造模过程中的死亡率。本发明提供了一种稳定性强、耗时短以及致死率低的肝脏诱癌剂、肝脏诱癌剂的制备方法以及基于肝脏诱癌剂建立原发性肝癌模型的方法。

主权项

一种制备肝脏诱癌剂的方法，所述肝脏诱癌剂是纳米化的DEN麻油溶液，所述纳米化的DEN麻油溶液中的DEN的含量是20.625 mg·ml‑1 ‑41.25 mg·ml‑1；所述DEN是二乙基亚硝胺；其特征在于：所述方法包括以下步骤：1）将DEN以及蛋黄卵磷脂溶于麻油中，制备得到油相；所述DEN的终浓度是10.97%V/V ‑21.94%V/V；所述蛋黄卵磷脂的终浓度是6%W/V；2）将Tween 80以及甘油溶于超纯水中，制备得到水相；所述Tween 80的终浓度是1.25%V/V；所述甘油的终浓度是2.81%V/V；3）在60oC恒温水浴的条件下，将步骤1）制备得到的油相滴入步骤2）制备得到的水相中，在1200 r/min的条件下搅拌15 min；所述油相与水相的体积比是1：4；4）在10000 rpm的条件下高剪切2 min，最终得到粒径是100 nm‑200 nm的乳化颗粒；5）在1000 bar的条件下高压均质5次即得到纳米化的DEN麻油溶液。