[发明专利]在细菌中产生双链蛋白质的方法有效
申请号: | 201580059703.4 | 申请日: | 2015-11-05 |
公开(公告)号: | CN107075548B | 公开(公告)日: | 2021-08-10 |
发明(设计)人: | J·朱利安诺蒂;D·赖利;K·奥罗里;L·C·西蒙斯 | 申请(专利权)人: | 基因泰克公司 |
主分类号: | C12P21/02 | 分类号: | C12P21/02 |
代理公司: | 北京坤瑞律师事务所 11494 | 代理人: | 张红春 |
地址: | 美国加利*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | 本文提供产生含有两条链的重组多肽诸如包含α链和β链的抗癌免疫动员单克隆T细胞受体(ImmTAC)蛋白的方法。特定来说,提供用于通过利用优化表达载体和培养方法来在细菌中产生异源性分泌蛋白的方法。 | ||
搜索关键词: | 细菌 产生 蛋白质 方法 | ||
【主权项】:
一种在原核宿主细胞中产生包含T细胞受体(TCR)α链和TCRβ链的抗癌免疫动员单克隆T细胞受体(ImmTAC)的方法,所述方法包括:(a)在培养基中在包括以下的条件下培养所述宿主细胞以表达所述ImmTAC的TCRα链和TCRβ链:包括生长温度和生长搅拌速率的生长期,和包括产生温度和产生搅拌速率的产生期,借此在表达后,所述TCRα链和所述TCRβ链折叠并装配以在所述宿主细胞中形成生物活性ImmTAC;其中所述宿主细胞包含多核苷酸,所述多核苷酸包含(1)编码所述ImmTAC的TCRα链的第一翻译单元;(2)编码所述ImmTAC的TCRβ链的第二翻译单元;和(3)编码至少一种选自由肽基‑脯氨酰基异构酶、蛋白质二硫化物氧化还原酶及其组合组成的组的伴侣蛋白的第三翻译单元;其中所述生长温度高于所述产生温度2至10℃,并且所述生长搅拌速率高于所述产生搅拌速率50至250rpm;和(b)从所述宿主细胞回收所述生物活性ImmTAC。
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