[发明专利]一种从南极假丝酵母发酵上清液中固定脂肪酶B的方法有效
| 申请号： | 201511028770.8 | 申请日： | 2015-12-31 |
| 公开（公告）号： | CN105462952B | 公开（公告）日： | 2018-06-29 |
| 发明（设计）人： | 段然;蒋四富;廖炜程;张斌;焉世杰;韩雯;沈初亮 | 申请（专利权）人： | 内蒙古金达威药业有限公司;厦门金达威集团股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N11/08 | 分类号： | C12N11/08;C12R1/72 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 010206 内蒙*** | 国省代码： | 内蒙古;15 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种固定南极假丝酵母发酵上清液中脂肪酶B的工艺方法。本发明使用较为廉价的载体，采用水相固定化方式，配合后处理工艺制备固定化南极假丝酵母脂肪酶B，提高了在水相吸附下的酶活回收率，在成本和使用效果方面进行平衡，对CALB的工业应用具有重要意义。 | ||
| 搜索关键词： | 南极假丝酵母 发酵上清液 南极假丝酵母脂肪酶B 固定化方式 固定脂肪酶 后处理 工业应用 工艺制备 重要意义 脂肪酶B 固定化 酶活 吸附 回收率 平衡 配合 | ||
【主权项】：
1.一种从南极假丝酵母发酵上清液中固定脂肪酶B的方法，其特征在于，方法包括以下步骤：1)发酵液预处理将南极假丝酵母发酵上清液降温预冷至15～20℃；2)树脂的预处理使用NKA‑II大孔树脂作为预柱填料，使用甲醇进行湿法装柱，使用甲醇作为流动相进行清洗，甲醇清洗后使用蒸馏水将甲醇洗出；使用HPD600大孔树脂作为吸附柱填料，使用甲醇进行湿法装柱，使用甲醇作为流动相进行清洗，甲醇清洗后使用蒸馏水将甲醇洗出；3)吸附操作使用预冷的发酵上清液上样，先后通过预柱和吸附柱，通过预柱出口蛋白浓度变化判断预柱是否饱和，通过吸附柱出口脂肪酶B酶活力变化判断吸附终点；4)吸附柱的后处理先后使用稀NaOH，含有锌离子的磷酸缓冲液，上样清洗吸附柱，之后使用含有锌离子的磷酸缓冲液将树脂从吸附柱中洗出并浸洗，使用蒸馏水漂洗并收集树脂，对树脂进行沸腾干燥，获得干燥树脂；5)干燥树脂的有机相处理使用含有十八烷的石油醚浸泡搅拌干燥树脂，收集树脂进行真空干燥，即得固定化南极假丝酵母脂肪酶B。
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