[发明专利]α-熊果苷的制备方法

摘要

本发明公开α-熊果苷的制备方法，以淀粉类物质和对苯二酚为原料，加入生物酶进行酶法转化反应；反应液经过除酶后，加入酵母菌发酵去除反应液中的葡萄糖；发酵液除菌后，通过一次结晶得到α-熊果苷粗品，溶解α-熊果苷粗品进行二次或多次重结晶可得到纯度99％以上的α-熊果苷。本发明使用酶法转化生产α-熊果苷，转化效率高；使用酵母菌发酵除糖替代了传统的柱层析除糖工艺，避免了柱层析过程中使用的酸、碱或者有机溶剂，而且大大节约了纯水的使用量；使用多次结晶工艺纯化α-熊果苷方法简便，产品纯度可控。

主权项

α‑熊果苷的制备方法，其特征在于，按照下述步骤进行：步骤1，将淀粉类物质作为糖基供体分散在蒸馏水中，加入对苯二酚作为糖基受体进行均匀混合，并调节反应溶液的pH为5—6，加入淀粉类物质的生物酶进行反应；在步骤1中，淀粉类物质为蔗糖、支链或者直链淀粉、环糊精、麦芽糊精或者麦芽低聚糖；淀粉类物质的生物酶为蔗糖磷酸化酶、淀粉酶、环糊精葡萄糖基转移酶或者糖基转移酶；淀粉类物质与对苯二酚的质量比例为(20：1)～(1：10)，选择在40—60℃下反应24—48h；淀粉类物质的生物酶加入量按照每g淀粉类物质100—300U淀粉类物质的生物酶进行确定；步骤2，待反应结束后，向反应溶液中加入葡萄糖淀粉酶，按照每g淀粉类物质加入1000—3000U的标准加入葡萄糖淀粉酶，50—60℃下水解5—12h，水解后副产物全部水解为α‑熊果苷，此时水解后的反应溶液为对苯二酚、葡萄糖、α‑熊果苷和酶的混合物；步骤3，将步骤2水解后的反应液经过超滤膜过滤除酶后，加入酵母菌进行发酵除去反应液中的葡萄糖，再通过微滤和吸附除去杂质；发酵温度为20～35℃，发酵时间为24—48h，选择能够消耗葡萄糖，且不水解α‑熊果苷的酵母菌，酵母菌的使用质量为反应液体积的1—10％(w/v，即酵母菌的质量/反应液体积)；步骤4，经步骤3处理后的反应料液通过减压蒸发进行浓缩，至固含量浓度为40～60wt％，通过结晶得到α‑熊果苷。