[发明专利]一种多孔磷酸钙材料及其制备方法

摘要

本发明公开了一种多孔磷酸钙材料及其制备方法。本发明通过在聚氨酯软泡模板上培养枯草芽孢杆菌(Bacillus substilis)PGA‑7 CCTCC M206102形成生物膜，利用该菌的胞外产物γ‑聚谷氨酸对钙离子的超强吸附作用，在温和条件下与磷酸盐发生反应，从而在聚氨酯软泡模板上沉积组装形成磷酸钙复合晶体并形成有序多孔微观结构，最后高温煅烧除去聚氨酯软泡模板制得多孔磷酸钙材料；其具有均匀的微米微米/亚微米微孔结构，并且微观孔径大小、宏观外观形态均可以根据模板孔隙大小、外形以及细胞生物膜特性进行改变；且对成骨细胞和骨髓基质干细胞没有明显的细胞毒性和凝血性，没有明显的致敏、刺激和遗传毒性；在生物医学工程中具有重要的应用价值。

主权项

1.一种多孔磷酸钙材料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：a、多孔模板预处理：接种枯草芽孢杆菌PGA‑7于液体培养基中制备发酵液，将无菌聚氨酯软泡模板吸满液体培养基后置于上述发酵液中在25～37℃、50～120r/min振荡培养24～72h，至模板模板内形成细菌膜；所述的枯草芽孢杆菌PGA‑7，其保藏编号为CCTCC M206102；所述的液体培养基每升含有：蛋白胨8～12g，酵母膏3～8g，NaCl 9～11g，余量为水，pH 6.8～7.4；b、高钙培养：将形成有细菌膜的模板移至每升含有0.01～1mol钙盐的高钙反应培养基中，25～37℃、30～50r/min振荡培养3～24h以吸附钙离子；所述的高钙反应培养基每升含有：0.01～1mol钙盐，蛋白胨4～6g，酵母膏1～4g，NaCl 3～6g，余量为水，pH 6.8～7.4；所述的钙盐为氯化钙、硝酸钙、磷酸钙、硫酸钙、碳酸钙或氢氧化钙；c、磷酸钙形成：取出步骤b制备的模板，用无菌蒸馏水清洗去除游离钙离子后，再置于液体培养基中，逐渐加入1.0～1000mmol/L磷酸盐，150～500r/min搅拌振荡，控制反应条件为25～60℃、pH 6.8～9.0、反应溶液中磷酸根离子浓度小于0.01mol/L，反应10～15天，至模板表面有白色晶体；所述的磷酸盐为磷酸二氢氨 、磷酸氢二氨 、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾或磷酸氢二钾；d、去模板：取出步骤c制备的模板并去除液体，1000℃～1250℃烧制1～2小时除去模板后得到多孔磷酸钙材料。