[发明专利]一种丝蛋白壳聚糖三维支架材料制备方法

摘要

一种丝素蛋/白壳聚糖三维支架材料制备方法，属于软骨组织工程支架材料制备领域。提供一种使用丝蛋白和壳聚糖来制备三维支架材料的制备方法。所述方法先制备丝素蛋白，再将丝素蛋白和壳聚糖混合处理，得到丝素蛋白/壳聚糖三维支架材料。该方法制备的丝素蛋白/壳聚糖三维支架材料符合软骨组织工程支架材料理化性质的要求，有望作为软骨组织工程较理想的支架材料。

主权项

一种丝素蛋/白壳聚糖三维支架材料制备方法，其特征在于：包括丝素蛋白的提取和三维支架材料制备两步骤；所述丝素蛋白的提取步骤为，将剪碎的蚕丝按质量体积比1∶50(mg∶mL)的比例加入0.5%Na₂CO₃和3g/L去污剂溶液，经脱胶，漂洗、烘干，得到丝素丝，丝素丝按1∶20(g∶mL)溶解于体积分数30% 乙醇和40%CaCl₂的混合溶液中，于80℃水浴箱中完全溶解，过滤得到丝素蛋白原液，用纤维素半透膜透析袋透析3d，以除去氯化钙和乙醇，丝素蛋白原液在50℃温度下搅拌浓缩，过滤，离心，除去不溶部分，得到丝素蛋白溶液，并测定其浓度；所述三维支架材料制备步骤为，将壳聚糖充分溶解于2%的醋酸中，丝素蛋白和壳聚糖按质量比为1∶1混合组，在搅拌器中充分混匀，倒入铸模中，‑80℃冰箱中过夜，然后用冷冻干燥机干燥得到丝素蛋白‑壳聚糖支架，将支架放入体积分数75%甲醇、1mol/L氢氧化钠混合液处理24h后，清洗干燥，浸入交联剂(含50mmol/L碳化二亚胺（EDC）、20mmol/L N‑羟基琥珀酰亚胺(NHS))常温交联8h，再清洗干燥，得到丝素蛋白/壳聚糖三维支架。